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坏死梭杆菌（Fusobacteriumnecrophorum，FN）是革兰氏阴性多形态厌氧菌，多存在于反刍动物坏死病灶中，引起人畜急性或慢性的坏死性疾病，是影响反刍动物健康的重要传染病之一。本研究采用改良的提取工艺提取FN的外膜蛋白（outermembraneproteins,OMP），分光光度计测定其浓度4.524mg/ml，SDS-PAGE电泳图谱显示集中在44.5kDa左右（OMP44.5），Westernblot分析显示，OMP44.5可以与兔抗血清结合，具有较好的免疫活性。通过小鼠攻毒实验和小鼠巨噬细胞的MTS实验发现OMP使小鼠脏器发生病变，细胞活力降低，表明OMP对小鼠细胞有毒性作用。在此基础上，利用PCR技术从FN基因组DNA中扩增OMP编码基因片段，将其克隆在pMD-18TSimple上并测序，测序结果与GenBank公布的基因序列比对同源性100%。构建pET-28a-OMP重组质粒转化到E.coliBL21（DE3）宿主菌中，IPTG诱导，镍柱纯化诱导表达的重组合蛋白，经SDS-PAGE和Westernblot鉴定，结果表明，OMP融合蛋白进行了有效表达并具有免疫活性，为坏死梭杆菌OMP亚单位疫苗的研究提供了理论依据。