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目的:利用基因芯片技术筛选喉鳞状细胞癌中差异表达的miRNA并探索其作用机制。方法:利用基因芯片技术筛选在喉鳞状细胞癌组织与癌旁正常喉上皮组织中差异表达的miRNA和mRNA,首先通过real-time PCR对目的miRNA的表达水平进行验证,随后采用反义寡核苷酸技术特异性降低喉癌细胞系HEp-2细胞内miRNA的表达,然后利用MTT、细胞聚集、划痕和transwell迁移与转移实验分析miRNA对喉癌细胞的影响。其次对mRNA表达谱进行聚类分析,在此基础上结合生物信息学对miRNA可能的靶基因进行预测,同时应用real-time PCR和Western blot验证靶基因mRNA和蛋白水平的变化,并通过构建EGFP荧光报告载体对靶基因进行验证。最后过表达确定的靶基因来分析目的miRNA发挥功能的途径。结果:本研究筛选出在喉癌组织中差异表达的miRNA共13个,其中明显上调的miRNA有6个,明显下调的miRNA有7个。而mRNA表达谱筛选出差异表达的基因共90个,上调基因为29个,下调基因为61个。其中上调最明显的]miRNA是miRNA-16-1,研究发现采用ASO-16处理能够提高预测靶基因zyxin的mRNA和蛋白表达水平,而过表达miRNA-16能够降低预测靶基因zyxin的1nRNA和蛋白表达水平,同时ASO-16处理也能够明显缓解miR-16对荧光报告载体中EGFP表达的抑制,以此确定zyxin是miR-16的直接靶基因。同时发现,ASO-16处理能够使HEp-2细胞之间黏附性增强,运动能力减弱,这与zyxin蛋白过表达所得到的结果相一致。结论:本文运用芯片技术筛选出喉鳞状细胞癌组织与癌旁正常喉上皮组织中miRNA和mRNA表达水平的差异,并结合生物信息学方法对miR-16的靶基因进行预测。最后通过实验证实miR-16可以通过直接调控靶基因zyxin的表达而抑制喉癌细胞的黏附性,增强肿瘤细胞的迁移、运动能力。该研究显示miRNA与喉癌的发生、发展密切相关,对进一步理解喉鳞状细胞癌的发生和发展机制具有重要意义。