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细胞外基质(extracellular matrix,ECM)是由多种大分子形成的高度有组织的网络结构,它主要由胶原蛋白、非胶原蛋白、弹性蛋白、蛋白多糖和氨基葡聚糖等构成。ECM是正常细胞维持生存运动和分化的适宜环境,它的及时降解对于胚胎发育、形态发生、组织的改建非常重要。基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)在其降解中起着重要作用,它不仅参与组织吸收和许多疾病过程中ECM的降解,而且通过特有的蛋白水解作用改变ECM大分子物质的生物功能。MMP-2在降解胞外基质过程中是最为重要的MMPs之一。本研究的目的是明确MMP-2在牙胚发育及炎症牙髓中的表达定位,研究LPS对体外培养的人牙髓成纤维细胞表达MMP-2的影响。主要研究内容及结果如下: 1.MMP-2在大鼠牙胚发育过程中的表达。 根据大鼠牙胚发育时序,采用免疫组化方法观察大鼠牙胚发育不同阶段MMP-2的表达。结果如下: MMP-2在帽状期和钟状期在牙乳头表达,钟状晚期在牙乳头和前成牙本质细胞中表达,分泌期在牙乳头和成牙本质细胞中强表达。此时正是基底膜消失的时期,提示MMP-2参基底膜降解。提示MMP-2在牙胚发育过程中参与牙形态的形成。 2.MMP-2在人牙胚发育过程中的表达。 本实验利用免疫组化染色,观察MMP-2在人牙胚发育不同时期的表达。 第四军医大学硕士论文 果表明如下: MMP.2表达区域 帽状晚期和钟状早期 牙乳头、釉上皮内层、前成牙本质细胞 钟状晚期 牙乳头、成牙本质细胞 分泌期 分化的成牙本质细胞高表达 它们的表达同样具有时空特异性,但与其在大鼠牙胚中的表达不完全一致。 MMPZ出现于钟状晚期的成牙本质细胞。说明不同种属的生物牙胚发育有相似 之处,MMPZ同样参与人牙胚基底膜降解。 3.MMPZ在大鼠牙髓炎症组织中的表达。 采用免疫组化方法观察了MMPZ大鼠炎症牙髓组织中的表达。结果:牙髓 炎症中MW-2广泛表达于牙髓细胞。结果表明:牙髓细胞可在外来刺激下增强 分泌MMPZ,参与基质降解。 4.LPS对体外培养人牙髓成纤维细胞MMP.二表达的影响。 本实验采用Western七*,半定量观察LPS对HDPF表达MMP-2的影响。 LPS浓度为 lP g/ml,刺激时间 Zd,sd,sd。结果显示与同时间对照组相比, 用1卜旮1uS刺激体外培养的*NC表达**卜2的量明显增加。不同时间组 之间,用1卜旮 *PS刺激组有随着时间推移表达量增强的趋势,而对照组之间 似乎稍有增加,但不显著。提示:LPS可直接改变牙髓成纤维细胞MMPZ的表 达量,影响炎症过程。