碱性果胶酶的深层发酵生产及其在棉织物前处理中的应用研究

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本研究用实验室已有产碱性果胶酶菌株(Paenibacillus pabliWZ008),在7L、15L两种机械搅拌通风发酵罐中深层发酵生产碱性果胶酶。研究得出了该菌株发酵生产过程中四个重要参数(菌体浓度、总糖含量、pH、酶活力)的变化规律。发酵条件为:接种量10%,装液量约70%,搅拌转速300rpm,通气量为25NL/min,发酵周期40小时。在该条件下,发酵结束酶活力为38.9U/ml(发酵液总体积6.7L),总酶活力单位260630U,生产强度为6515.8U/h,体积产酶率为972.5U/(L·h)。发酵液经硫酸铵分段盐析(50-80%)、真空冷冻干燥制得碱性果胶酶粗酶粉。用上述方法所制酶粉用于棉织物的前处理,研究了不同乳化剂与碱性果胶酶复配对棉织物前处理效果的影响。结果表明,乳化剂的加入可以明显提高酶精练的效果。选出了三种效果突出的乳化剂:Tween-80、Span-20、DATEM。将这三种乳化剂与碱性果胶酶复配,利用正交实验并综合考虑成本的因素,得出了较优的复合酶制剂配方:碱性果胶酶60U/g,Tween-80 0.6%,Span-20 0.6%,DATEM0.15%。同时将酶处理与碱处理工艺进行了对比得出,酶处理相对于碱处理可以明显改善织物性能,再加上其温和性和无污染性,使其在棉织物前处理中具有广阔的应用前景。由于该碱性果胶酶的热稳定性不佳,为了提高碱性果胶酶的热稳定性从而达到降低其工业化应用成本,本文研究了羧酸盐、多羟基化合物、糖类物质和金属离子对酶活力和热稳定性的影响。乙酸钠能显著改善酶的热稳定性,Ca2+能明显提高酶活力,因此最终选择乙酸钠和Ca2+作为酶的保护剂。最后将加保护剂和未加保护剂的酶热稳定性参数(Ea、Tm等)进行了对比,加保护剂酶的热稳定性确实有明显的改善,活力也有明显的提高。
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