基于血凝素茎部区的大肠杆菌可溶性表达乙型流感广谱疫苗的设计研究

来源 :厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:AsiaITt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
流感病毒一直以来威胁着人类的生命健康,每年季节性流感流行可造成数以万计的感染患者甚至死亡。防治流感病毒的最有效方式是接种疫苗,而目前接种的流感疫苗均为毒株特异性的疫苗,经常与流行毒株发生抗原性错配,导致疫苗保护效力的大幅下降。因此,研发具有广谱保护力的通用流感疫苗是科研人员不断追求的目标。血凝素蛋白(HA)是流感病毒表面最重要的糖蛋白,其头部区易突变,茎部区相对保守,因此,血凝素茎部区蛋白成为研究通用流感疫苗的重要靶标。过去人们对乙型流感病毒的危害认识较少,因此基于甲型流感病毒的通用流感疫苗的研究报道较多,而乙型流感病毒的研究报道相对较少。为填补空缺,我们尝试基于乙型流感病毒血凝素茎部区设计可广谱保护两种亚系乙型流感病毒感染的通用乙型流感疫苗。本研究从突变速度较快的V亚系乙型流感病毒中选择了一株感染能力较强的经典毒株B/Brisbane/60/2008,对其血凝素蛋白茎部区进行表达研究。我们基于茎部区序列设计了两种克隆,发现其均可以再大肠杆菌表达系统中可溶表达,经由Ni柱纯化最终成功得到B60-stem-8071,其在HA茎部区基因的基础上嵌合了广谱中和抗体CR8071表位。经体外实验证明其具有良好的抗原性和免疫原性,通过对皮下免疫的小鼠进行攻毒实验,证明其能够有效降低小鼠肺部病毒滴度,减轻肺部病理损伤从而实现对两种不同亚系病毒的完全保护的作用。进一步我们对其保护机制进行了初步探索,通过对免疫血清性质鉴定和T细胞阻断实验证明了该疫苗对两种亚系病毒的保护都是基于血清中的保护性抗体。本实验中基于乙型流感病毒设计的血凝素茎部区广谱疫苗,是对乙型流感病毒广谱疫苗研究的一个补充,通过对设计疫苗性质以及免疫机制的初步探索,为以后乙型流感通用疫苗的开发提供一定的参考。
其他文献
股票市场的蓬勃发展为各类企业融资提供了广阔的证券融资平台,也使其成为人们日常经济社会生活中,不可或缺的一部分,为促进我国的经济社会建设发挥了重要的推动作用。然而,当股票价格发生巨大波动时,股票市场会受到强烈的冲击。尤其是,当股票价格发生暴跌时,造成的破坏是巨大的。由于股价崩盘引发的后果严重,如何避免股价崩盘,降低股价崩盘风险成为了受关注的问题。相比欧美国家,我国股票市场成立和发展的时间相对较短。虽
学位
乙型肝炎病毒的慢性感染是严重的全球性公共卫生问题之一,虽然预防性疫苗的全面推广已大大降低乙型肝炎的发病率,但全球仍有约2.4亿的慢乙肝患者,迫切需要行之有效的治疗方式加以治疗。目前常用的乙肝治疗药物只能控制病情发展实现功能性治愈,并不能根除患者体内的乙肝病毒,难以达到理想的治疗终点。因此,研制更为有效的治疗药物依旧是当前研究的重点。新药的研发离不开基础病毒学领域的发展,建立一个能支持乙肝病毒完整生
学位
近红外荧光活体成像是一种高时空分辨率的荧光成像方式,以往使用的近红外一区(波长700-900nm)成像穿透深度较低,且由于组织自发荧光、组织光散射和组织光吸收的影响,无法达到深层组织成像的目的。而在近红外二区(1000-1700 nm)荧光成像区域,生物组织具有较低的散射系数和自吸收,因此具有更深的穿透深度,成为目前荧光活体成像的引领性技术。目前应用于近红外二区的荧光探针主要有包含量子点、稀土类纳
学位
伴随着经济全球化的不断发展和全球各国的联系逐步深化,一个联系更加紧密的经济系统正逐渐形成,日益繁多的经济贸易摩擦和不同的经济体制结构因素都会导致整金融市场的波动,近年来来自国际金融危机、市场内部结构调整、中美贸易摩擦以及最近由新冠疫情作为全球公共卫生事件所引起的冲击都加剧和放大了金融市场波动。随着金融工具的日趋多样化和复杂化,投资者的持仓时间相比较几十年前明显缩短,投资期限的缩短对于投资者本身是否
学位
利用基因工程重组技术制备重组蛋白是蛋白质结构与功能研究的基础。以大肠杆菌(Escherichia coli,E.Coli为表达宿主的原核蛋白表达系统,具有操作简便、成本低廉、易扩大培养等优点,在生物医学研究中广泛应用。但该系统也存在一些不足,主要包括部分重组蛋白的可溶性表达水平低、可能因折叠不正确而呈包涵体表达、蛋白不稳定易降解等,导致目的蛋白制备纯化的难度增加。蛋白融合标签的发明和应用可部分解决
学位
贝德里赫·斯美塔那(1824—1884)是捷克作曲家、钢琴家和指挥家、捷克古典音乐的奠基人、捷克民族乐派的创始人。笔者选择斯美塔那钢琴曲集《捷克舞曲》(14 Czech Dances)作为分析研究的主要对象,《捷克舞曲》包含两部分,第一部分包含四首波尔卡,第二部分包含十首不同风格的舞曲。这是斯美塔那最优秀的钢琴作品之一,旋律充满浓郁的民族特色,通过研究和分析《捷克舞曲》,可以更深入的理解这部作品的
学位
近年来,供应链金融为中小企业解决融资困境有着明显优势,资产证券化的应用使供应链金融进入全新阶段,保理资产证券化就是指上游供应商与核心企业在商业往来的过程中形成应收账款作为基础资产,由保理公司打包给专项计划,在评级机构进行评级后,这些资产将以证券化的形式在市场上流通,让投资者购买,在到期日债务人向专项计划支付资金,偿付投资者的本息和相关费用。该模式依托核心企业的信用进行背书,打破中小企业因信息不对称
学位
食管癌是全球六大致死肿瘤之一,中国是食管癌高发地区,鳞癌占90%以上,当前的放化疗和手术切除都会导致复发。我们前期研究发现转录因子Sox2和磷酸化Stat3协同使食管上皮干细胞恶变成食管鳞癌,且同时具有高表达Sox2基因和磷酸化Stat3的食管鳞癌患者的生存率更低。在本实验中,我们首先在KYSE450细胞中建立了 Sox2和Stat3敲减食管鳞癌细胞系,通过生物信息学分析,筛选出了两条共同受Sox
学位
HBV的感染对全世界而言仍然是一个严重的公共卫生问题,2015年全球约有2.57亿CHB感染者,占总人口比例的3.6%,每年约有88.7万人死于HBV感染引起的肝硬化和肝癌,其中最主要的是CHB相关肝病引起的死亡。CHB患者的理想治疗终点是实现HBsAg血清学阴转(HBsAgloss),然而由于病人体内高滴度的HBsAg导致他们产生免疫耐受,基于现有药物(干扰素或核苷/核苷酸类似物)进行的治疗难以
学位
在信息技术快速发展的今天,社会对人才的培养提出了更高的要求。在国际教育都在思考核心素养内涵的背景下,科学写作被广泛运用到科学教育中。在新教育弘扬阅读与写作、追求幸福完整的教育生活的理念下,本研究通过在农村初中开展化学写作,促进学生实验能力、思维能力等科学素养的发展和提高。本研究通过文献研究了解国内外的科学写作成果,通过研习国外理科教材借鉴化学写作的内容和表现形式,通过行动研究逐步摸索教育实践的策略
学位