茄子(Solanum melongna L.,2n=2x=24),是茄科茄属一年生草本植物,以浆果为产品,营养十分丰富。花药培养技术是目前新品种选育和种质创新的一种重要手段,可在短时间内培养获得纯合单倍体和二倍体植株,获得纯系。有研究表明茄子花药培养能获得花粉细胞起源的再生植株,且茄子花药培养较花粉培养技术更加简单,因此国内茄子单倍体技术育种研究以花药培养为主。但目前茄子花培体系尚不完善,实际应用中还存在较多问题,如花药污染率高、出胚率低等。本研究以茄子为材料,从花药最适培养时期选择、最佳消毒试验、最优培养基筛选等方面着手,旨在构建高效稳定可靠的茄子花药离体培养体系,以期获得花粉起源的植株,为创造茄子新种质奠定基础。采用植株形态比较、气孔大小和保卫细胞叶绿体计数等间接鉴定植株倍性的方法,结合染色体计数确定再生植株的倍性,从中筛选便捷可靠的茄子再生植株倍性鉴定法,以提高茄子单倍体育种的效率。主要研究结果如下:1.通过花药压片法制片,建立花蕾外部形态与花粉发育时期的对应关系,发现花蕾萼裂基部差1-2 mm,花药呈黄绿色时小孢子处于单核靠边期,最适宜进行花药培养。建立了花药最佳消毒方法,剥去萼片的花蕾用75%乙醇处理2min,再用6.5%次氯酸钠(含活性乳5.2%)加一滴吐温-80消毒12min,无菌水冲洗4-5遍后进行接种。2.优化培养基及花培体系,预处理培养基:MS+2,4-D0.2mg/L+Vc8.0mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖 30 g/L+琼脂粉 8 g/L;诱导培养基:MS+BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+蔗糖 30 g/L+琼脂粉 8 g/L;分化培养基:MS+NAA0.1 mg/L+ ZT 1.0 mg/L +Glu 800 mg/L+GsH 30 mg/L+L-Ser 100 mg/L +蔗糖 30 g/L+琼脂粉 8 g/L;生根培养基:1/2MS+2-BA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖 20 g/L+琼脂粉 8 g/L;pH 5.8。通过该体系获得6株花培再生植株。3.通过观察再生植株根尖和花药细胞中染色体数目,结合再生植株外部形态及育性,并采用叶片下表皮气孔大小观测和叶绿体计数等方法,以花药来源的原始二倍体为对照,对花培植株进行倍性鉴定,结果表明,6株再生植株中,4株为单倍体,1株为二倍体,1株为四倍体。本研究发现根尖细胞染色体计数法是鉴定单倍体的最佳方法;多倍体可以采用减数分裂过程进行倍性鉴定;表皮气孔大小、保卫细胞中叶绿体数目、成株期叶形指数均可作为倍性鉴定的间接方法;三种间接鉴定方法结合植株开花结实性,可以准确鉴定植株倍性。