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目的： 化疗在妇科恶性肿瘤治疗中占有重要的地位。恶性滋养细胞肿瘤是经过单一化疗能够获得治愈的疾病。妇科常见的恶性肿瘤如卵巢癌、宫颈癌等也是对化疗较为敏感的肿瘤。然而，反复和大剂量化疗带来的骨髓抑制，以及由此所致的化疗剂量减少、疗程缩短及耐药病例增加，是目前妇科恶性肿瘤治疗中面临的主要问题之一。探索化疗中保护骨髓细胞的有效途径，对于提高恶性肿瘤的治疗效果具有重要意义。多药耐药基因(mdr1)编码一种分子量为170kD的跨膜糖蛋白，又称P170。其可将多种细胞毒性化疗药物如泰素(Taxol)、阿霉素(Doxorubicin)、长春新硷(VCR)及鬼臼乙叉甙(VP16)等排出细胞外，从而使细胞对于上述药物产生耐药性。本研究将人mdr1基因导入人CD34~+细胞，观察基因转导后对造血祖细胞的化疗保护作用，并探讨影响基因转导的因素。 方法和结果： 本研究包括以下三个部分： 一、建立含人mdr1基因的逆转录病毒包装细胞系 本研究采用具有较高mdr1基因转导效率的逆转录病毒载体SF-MDR，利用脂质体介导的基因转移方法，将其分别导入单嗜性包装细胞GP+E86和双嗜性包装细胞GP+envAM12，秋水仙素筛选获得抗性克隆。通过单嗜性和双嗜性包装细胞培养上清在32℃，“乒乓”转染，以提高包装细胞系GP+envAM12的病毒滴度。用NIH3T3放大实验进行野生型辅助病毒的检测。 结果：获得了含人mdr1基因的产病毒单嗜性和双嗜性包装细胞抗性克隆。通过单嗜性和双嗜性包装细胞培养上清在32℃，“乒乓”转染，使包装细胞系OP+envAM12的病毒滴度由1×10~4cfu／ml升至1.6 x 10~5cfu／ml。包装出的逆转录病毒转染靶细胞后，无产生野生型辅助病毒的能力。 二、人脐血CD34~+细胞的分离及体外扩增 采用单克隆抗体-磁珠系统，分离出人足月分娩脐血中的