论文部分内容阅读
侧孢芽孢杆菌BL-1是黑龙江大学微生物重点实验室分离并保存的一株生防菌,其代谢产物具有广谱抗菌功能,在生物防治领域,具有广阔的应用前景。但是野生型菌株通常产生的抗菌物质浓度非常低,因此,采用微生物育种的方法提高抗菌物质的浓度,对其进一步深入研究具有十分重要的意义。本文首先测定了侧孢芽孢杆菌BL-1对部分病原真菌和细菌的抑制效果,结果表明它对甜瓜枯萎、小麦赤霉、稻瘟病菌等多种植物病原真菌具有抑制作用。同时,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等多种细菌也有明显的抑制效果。对侧孢芽孢杆菌BL-1依次进行紫外线诱变、DES诱变和亚硝酸诱变三次诱变处理,最终获得一株高产突变株HBL-B26,其效价值由最初的15AU/mL提高到64.48AU/mL,后经过传代十次试验表明,该菌株的遗传性能比较稳定,然后将该菌株通过自身代谢物的抗性筛选,得到HBL-B26-A3,其效价值达到68.24AU/mL。对高产突变株HBL-B26-A3的发酵培养基进行了优化,通过正交试验设计方法对培养基的4个单因子进行优化筛选,经软件分析后确定发酵培养基最佳配比为:葡萄糖(6g/L)、牛肉膏(14g/L)、NaC l(6g/L)、MnSO4 (0.05 g /L)。验证实验证明,采用优化后的培养基,菌株发酵液的效价值可达到83.54±1.69 AU/mL,与同等培养条件下,未优化的培养基相比,效价值提高了22.07%。最后通过单因子试验对菌株HBL-B26的发酵条件进行了优化,确定的最优培养条件为:培养基初始pH值8.0、发酵温度30℃、装液量为100mL/250mL、接种量为2%、发酵最佳时间为48 h。采用优化后的培养条件进行摇床培养,HBL-B26-A3所产抑菌物质的效价值为91.45±1.59 AU/mL,与未优化时的培养条件相比较,效价值提高了9.38%。