研究目的：　　 探讨IL-25基因在DBA／1小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)发生发展过程中的作用,及其作为类风湿性关节炎治疗靶点的可能性。　　 研究方法：　　 (1)根据国内外文献,应用鸡Ⅱ型胶原诱导DBA／1小鼠,建立胶原诱导的关节炎模型,对病变关节行HE染色并根据病理显示的炎症程度进行疾病的分期。　　 (2)构建小鼠IL-25标准质粒,应用荧光定量PCR法分析不同发病时期小鼠脾脏和局部关节滑膜组织中IL-25的表达情况；ELISA检测小鼠不同发病时期血清和脾脏细胞培养上清中IL-25蛋白水平的表达。　　 (3)收集各期小鼠关节组织、脾脏,应用荧光定量PCR法和流式细胞分析检测病变关节滑膜及脾脏相关炎症因子的表达水平,并分析这些炎症因子与IL-25的相关性。　　 (4)间接免疫荧光染色,观察关节局部滑膜炎症因子IL-4的表达情况。　　 (5)荧光定量PCR法检测mIL-25作用于DC2.4细胞系后分泌的细胞因子的变化。　　 研究结果：　　 (1)成功建立了鸡Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,小鼠关节炎的发病率为100％,平均发病时间为35±5天。并根据炎症的严重程度将疾病划分为发病早期和发病高峰期。　　 (2)构建小鼠IL-25标准质粒,RT-PCR检测小鼠脾脏和局部关节滑膜组织中IL-25的表达。结果显示:在CIA小鼠发病早期,IL-25虽有升高,但与正常小鼠相比,并无明显的统计学差异。而在发病的高峰期,IL-25持续上升,显著高于对照组和炎症早期。ELISA检测小鼠不同发病时期血清和脾细胞培养上清中IL-25蛋白水平,结果显示:在CIA发病高峰期,IL-25明显增强。　　 (3)RT-PCR以及流式细胞技术分析CIA相关炎症因子的表达水平。研究表明:在CIA发病早期,IL-17明显高于正常组,而在发病高峰期却有下降的趋势,且在早期与IL-25有明显的负相关；RT-PCR及免疫荧光检测发病整个过程中IL-4的表达,IL-4在发病高峰期明显增高,并在此期与IL-25呈正相关；RT-PCR以及流式细胞技术分析IFN-γ,发现在整个CIA疾病过程中都处于较高水平,且与IL-25并无直接的关系。　　 (4)RT-PCR检测mIL-25重组蛋白对DC2.4细胞系所分泌的细胞因子的影响。实验结果显示:经IL-25作用后,DC2.4所分泌的IL-6,IL-23及TGF-β均下调。　　 结论：　　 IL-25也称为IL-17E,是IL-17家族成员之一。主要是由Th2类细胞和肥大细胞产生。与其他家族成员明显不同的是:IL-25能够诱导IL-4、IL-5以及IL-13的表达。本实验应用胶原诱导性关节炎小鼠模型来探讨IL-25的表达及其可能的作用机制。研究发现:IL-25在小鼠CIA的高峰期表达明显增高。在疾病早期抑制前炎症因子IL-17的产生,在后期则诱导IL-4的表达。提示,IL-25在类风湿性关节炎的发生、发展中起着关键性的作用。研究其可能的作用机制,有助于临床类风湿性关节炎的防治寻找新途径。