【摘 要】
：
目的:椎间盘突出后继发的人体自身免疫反应和炎性刺激被认为是腰椎间盘突出症患者腰背部及下肢疼痛,活动受限等症状出现的主要原因。同时miR-146a被证明能有效抑制体内炎症反应。本实验是通过将miR-146a基因转染至BMSCs中得到稳定表达的重组干细胞,实现miR-146a在BMSCs中稳定表达的可调控性,为下一步研究miR-146a基因修饰BMSCs在治疗椎间盘突出症导致的腰背部疼痛奠定实验基础。
论文部分内容阅读
目的:椎间盘突出后继发的人体自身免疫反应和炎性刺激被认为是腰椎间盘突出症患者腰背部及下肢疼痛,活动受限等症状出现的主要原因。同时miR-146a被证明能有效抑制体内炎症反应。本实验是通过将miR-146a基因转染至BMSCs中得到稳定表达的重组干细胞,实现miR-146a在BMSCs中稳定表达的可调控性,为下一步研究miR-146a基因修饰BMSCs在治疗椎间盘突出症导致的腰背部疼痛奠定实验基础。方法:通过全骨髓贴壁筛选法提取、分离SD大鼠BMSCs,并取第三代BMSCs通过流式细胞技术检测BMSCs表面抗原CD90、CD106、CD45来鉴定BMSCs。取第三代BMSCs转染携带miR-146a基因的慢病毒载体,转染后观察EGFP表达情况及感染率,应用qRT-PCR、Western Blot技术分别检测miR-146a基因及其靶蛋白IRAK-1、TRAF6表达情况。结果:经流式细胞技术鉴定第三代BMSCs中表达CD90、CD106不表达CD45。携带miR-146a基因的慢病毒载体转染BMSCs的最佳MOI值为50,转染率可达80%;EGFP荧光表达48h后开始逐渐增强;qRT-PCR提示与未转染组及阴性对照组相比转染细胞中目的基因miR-146a高的表达(P<0.05);Western Blot提示转染miR-146a基因的BMSCs中IRAK-1、TRAF6蛋白含量降低。结论:⑴通过全骨髓贴壁筛选法能够获取纯度较高的BMSCs;⑵通过携带miR-146a基因的慢病毒载体成功转染BMSCs并能够稳定表达,为基因治疗腰椎间盘突出症导致的腰背部疼痛提供了理论基础。
其他文献
当今,世界经济迅速发展,而中国的经济发展更取得了举世瞩目的成就,但在这成就背后却是以牺牲环境为代价。中国目前处于工业化进程中,技术水平、产业结构特征和经济发展方式有
同系列、不同接触角的角接触球轴承套圈沟道位置不同,套圈要分批加工,投料次数多。以7005型和B7005型角接触球轴承为例,提出了一种新的套圈沟道位置设计方法。采用新的设计方
目的探讨和分析腹部外科手术切口感染的危险因素,并根据其特点制定有针对性的干预对症进行预防。方法选取622例接受外科手术治疗的患者为研究对象,对上述选取对象的临床资料
<正>在高中化学教学中,化学反应速率教学具有重要意义,在考试中也占有较大比重.化学反应速率内容具有抽象性、综合性等特点,学生对此部分内容的掌握存在困难.探究实验,能将抽
为了解构树不同成熟度果实上的种子萌发能力,在30℃、12 h光照+12 h黑暗条件下,将青果、微红果、红果和过熟果的种子分别进行催芽处理后在恒温下萌发。结果表明:不同成熟度果
针对胜利油田多个采油厂联合站的计算机网络系统综合雷电灾害的勘察情况,依据国家有关标准规范,制定了信息系统采用外部保护、内部保护、等电位连接、电磁干扰屏蔽等有效措施
<正>据国家新闻出版广电总局电影资金办统计,今年国庆档票房逾18.5亿元,成为"史上最强国庆档"。此前也有报道:由徐峥自导自演的《港囧》,内地票房6天就破了10亿元大关,是国产
<正> 现代人似乎都知道什么是神。但若认真起来,则未必谁都知道什么是神。比如,不知有多少人知道,上古有一个时期,动物,曾经被人们当作神祇加以崇拜。
通过气相色谱法,对3个不同环境下合丰25(亚麻酸含量7.48%)×父本L-5(亚麻酸含量2.66%)的F6代重组自交系籽粒的脂肪酸组分含量进行测定。分析了不同地点的5种脂肪酸的相对含量
“营业自由”在近代中国宪法文本中是流行的关键性词语,自日本传入中国以后,对近代中国的宪法文本产生了深远的影响。近代中国宪法文本中的“营业自由”基本含义有多重表达,