脂类物质对蜜蜂的生长发育、生产性能以及寿命等都有非常重要的作用,其中胆固醇作为脂类物质中的甾醇之一,不仅是生物膜的构成物质更是蜕皮激素合成的前体物质,对蜜蜂的生长发育起着重要调控作用。蜜蜂体内缺乏胆固醇,则会引起发育迟缓、寿命缩短。昆虫无法自身合成胆固醇,只能从食物中摄取。目前,关于饲粮中添加胆固醇对蜜蜂生长发育的影响的研究较少。本试验以意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica）为研究对象,对室内人工饲养的幼虫饲喂不同胆固醇水平的饲粮,采用组织形态学、分子生物学等技术,检测意大利蜜蜂的生长发育、形态发育、卵巢发育和蜕皮激素相关基因的表达,为探索胆固醇对蜜蜂发育的影响提供参考。移取意大利蜜蜂1日龄幼虫1 440只,随机分为6组,每组10个重复,每个重复24只幼虫。其中一组为对照组饲喂基础饲粮,胆固醇（Total cholesterol,Tc）添加水平为0.00%,其余5组为试验组,分别饲喂胆固醇添加水平为0.05%、0.10%、0.25%、0.50%和1.00%的基础饲粮。在恒温恒湿培养箱中（温度34.5°C,相对湿度为90%）,室内人工饲养至羽化出房。检测蜜蜂幼虫化蛹重,化蛹率,新蜂初生重、羽化率、发育历期及形态学等指标;每组取3、4、5日龄幼虫、白眼蛹（Pw）、粉眼蛹（Pp）和新蜂（NEW）等不同时期的样品,检测基因表达量等分子生物学指标。分析结果如下:饲粮中添加胆固醇对意大利蜜蜂生长发育的影响:1)各试验组化蛹率和羽化率随饲粮中胆固醇水平增加呈先上升后下降趋势,与对照组相比无显著差异（P>0.05）,但各试验组与Tc1.00%组比,化蛹率和羽化率显著增加（P<0.05）;2)与对照组相比,饲粮中添加胆固醇水平为0.25%和0.50%时,显著增加意大利蜜蜂幼虫的化蛹重和新蜂初生重（P<0.05）;3)与对照组相比,添加胆固醇的各试验组发育日期显著缩短（P<0.05）;4)与对照组相比,饲粮中添加胆固醇水平为0.05%时显著增加前翅宽（P<0.05）;饲粮中胆固醇水平为0.25%-1.00%时显著增加股节长（P<0.05）,显著缩短胫节长、基跗节长及基跗节宽（P<0.05）,对新蜂体长、前翅长、前翅肘脉数无显著影响（P>0.05）;5)饲粮中添加胆固醇显著促进卵巢发育,与对照组相比,饲粮中胆固醇水平为0.25%-1.00%时,卵巢管数显著增多,达上百条,提示饲粮中添加胆固醇促使蜜蜂向蜂王方向发育。RNA转录组测序结果表明,饲粮中添加胆固醇,蜜蜂产生的差异基因富集在昆虫激素的生物合成通路上,经过筛选,发现昆虫蜕皮激素生物合成通路上的CYP302A1、CYP314A1、CYP315A1基因上调,促进蜕皮激素的合成。饲粮中添加胆固醇对意大利蜜蜂基因表达量的影响:1)胆固醇对蜕皮激素合成通路上的关键调控基因CYP450家族基因表达量影响显著（P<0.05）,表现为胆固醇水平为0.50%时,幼虫期和蛹期CYP302A1、CYP314A1、CYP315A1表达量显著升高（P<0.05）,提示胆固醇对蜜蜂幼虫期蛹期蜕皮激素合成有较强促进作用;2)蜕皮激素应答基因（E74）是蜕皮激素调控蜜蜂生长发育的下游基因,饲粮中胆固醇水平对蜜蜂生长发育各阶段E74表达影响中,在幼虫期4日龄和5日龄和粉眼蛹时期,Tc0.50%组E74表达量显著升高（P<0.05）,提示蜕皮激素调节E74的表达进而调控蜜蜂的生长和发育;3)卵黄原蛋白基因（Vg）与蜜蜂的产卵性能息息相关,饲粮中添加胆固醇可以显著提高新蜂时期Vg表达量（P<0.05）,Tc0.50%组较CK组影响最显著（P<0.05）,提示饲粮中添加胆固醇使蜜蜂产卵性能增强。本研究表明:幼虫饲粮中添加胆固醇,促进蜕皮激素合成通路关键基因CYP302A1、CYP314A1、CYP315A1等高表达进而促进蜕皮激素的合成,然后调控其下游基因E74及其他相关基因Vg等影响蜜蜂幼虫生长发育和新蜂形态等指标。经对比发现饲粮中胆固醇水平为0.50%时对蜜蜂的化蛹率、羽化率、体重、卵巢管数、翅宽等起到促进作用,有利于蜜蜂的生长发育。