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决定物种多样性的遗传物质大部分都包含在物种的精子中，这些遗传物质构成了生态系统的物质基础。随着社会的发展，科技的进步，动物物种灭绝的种类越来越多，灭绝速度越来越快，所以对动物种质资源的保护就越来越重要。对动物的精子进行超低温冷冻保存成为了一种对动物种质资源保护的主要方式，动物精子质膜中含有大量的脂质，这些脂质能够影响精子的受精、顶体反应和精卵融合等生理活动，它们在精子的低温保存中发挥了举足轻重的作用，这些脂质的主要磷脂和胆固醇组成。采用相应的实验方案对几种鱼类精子进行冷冻后发现，这几种鱼类精子的活力大幅下降，并且精子中磷脂和胆固醇的绝对含量均下降。同时，超低温冷冻鱼类精子发生冷冻损伤主要是是因为冷冻过程中精子内和精子间产生各种冰晶结构，使膜产生不同程度的损伤，从而导致细胞破裂以及膜上的信号分子丢失而使精子的功能丧失。脂筏作为细胞膜上的特殊组成部分，不仅对于细胞膜的流动性起到关键性作用，而且携带着大多数的细胞膜信号分子，提高信号传导的特异性和速效性。而且，对于脂筏的研究国内外大都集中于哺乳动物，对鱼类精子的脂筏研究相对较少。所以，研究脂筏在鱼类精子冷冻保存过程中的变化就显得尤为重要了。 本研究的主要内容为:1）以黄颡鱼为研究材料，探索黄颡鱼精子在超低温冷冻的保存后脂筏含量的变化;2）以黄颡鱼为研究材料，探索黄颡鱼精子在超低温冷冻保存后脂筏相关的基因LXR、ABCA1、KDSR、LASS2、DEGS2、SGMS1表达情况;3）以黄颡鱼为研究材料，探索黄颡鱼精子在超低温冷冻保存后ABCA1蛋白的表达情况;4）以黄颡鱼为研究材料，探索鞘磷脂酶抑制剂对黄颡鱼精子活力及其抗冻性的影响。 本研究是在以前的黄颡鱼精子冷冻方案已经建立的基础上，用流式细胞术对黄颡鱼鲜精组(Fresh)和冻精组（Cryopreservation）以及胆固醇转入组(CLC)和胆固醇剔除组(CD)的脂筏含量进行测定，结果显示超低温冷冻保存对精子脂筏含量有影响，胆固醇转入组、胆固醇踢除组的MFI分别为(12.7833±0.96925)、（10.3444±0.91948）与鲜精组（11.3933±0.99587）之间无显著性差异，较好方案冻精组（5.8622±0.39021）、较差方案冻精组（4.5233±0.62818）与鲜精组之间有显著性差异;用实时荧光定量PCR对鲜精组和冻精组的脂筏相关基因的表达进行定量检测，实验结果表明超低温冷冻保存对精子中脂筏相关基因的表达有影响，冻精组的LXR mRNA、ABCA1 mRNA、KDSR mRNA、LASS2 mRNA、DEGS2mRNA、SGMS1 mRNA表达量分别为0.293±0.061、0.08077±0.00023、0.42779±0.015、0.053289±0.00011、0.03847±0.00010、0.615572±0.053与鲜精对照组(1.0)相比均有显著性差异(P＜0.01);用蛋白印迹法检测黄颡鱼鲜精组和冻精组以及胆固醇转入组和胆固醇剔除组的ABCA1蛋白表达，实验结果显示鲜精胆固醇转入组（2.6±0.09）、鲜精胆固醇剔除组（1.9±0.07）、较好方案冻精组（3.4±0.12）、较差方案冻精组（3.9±0.09）与鲜精对照组(1.0)之间存在显著性差异(P＜0.01);在鞘磷脂酶抑制剂对黄颡鱼精子活力及其抗冻性方面，实验结果显示孵育时间为30分钟时，45μM组鲜精活力（79±3.25）、50μM组鲜精活力（74.3±4.138）、55μM组鲜精活力（72.6±5.165）与鲜精对照组（85.6±5.367）之间具有显著性差异(P＜0.01);孵育时间为60分钟时，45μM组鲜精活力（72.6±4.31）、50μM组鲜精活力（60.35±4.36）、55μM组鲜精活力（51±3.48）与鲜精对照组（80.3±5.18）之间具有显著性差异(P＜0.01);孵育时间为90分钟时，45μM组鲜精活力(68.6±4.25)、50μM组鲜精活力（51.3±4.86）、55μM组鲜精活力（39.5±5.72）与鲜精对照组（77.8±4.95）之间具有显著性差异(P＜0.01);35μM组冻精活力（38.351±2.34）、40μM组冻精活力（33±3.01）、45μM组冻精活力（30.133±2.57）、50μM组冻精活力（25.36±2.154）与对照组冻精活力（45.325±3.29）之间具有极显著性差异(P＜0.01) 根据实验结果我们可以知道，超低温冷冻保存影响精子的脂筏含量，鲜精组脂筏含量明显高于冻精组;同时，精子的活力与精子所含脂筏的量有一定的关系，胆固醇转入组的精子活力比超低温冷冻组的活力要高，而胆固醇是构成脂筏的主要脂质;但是，我们在用鞘磷脂酶抑制剂抑制鞘磷脂酶的活性，增加鞘磷脂的含量的实验中，实验结果显示精子活力随着鞘磷脂酶抑制剂浓度的增加以及孵育时间的延长而下降，这可能是因为我们人为的抑制了精子里面正常的代谢途径，影响了精子的获能与其他的生理生化反应导致精子的活力下降。这些结果表明在黄颡鱼精子的超低温冷冻保存中，脂筏的含量对于精子的抗冻性起着一定的作用，为进一步研究精子冷冻保存的损伤机制奠定基础，为建立更好的冷冻方案找到机理。