由尖镰孢菌西瓜专化型（Fusarium oxysporum f.sp.niveum,FON）侵染引起的西瓜枯萎病是世界范围内发生的土传病害。利用哈茨木霉（Trichoderma harzianum）防控该病害被证明是可行的绿色防控方法。对哈茨木霉和FON在西瓜植株根部定殖规律的认识有助于西瓜枯萎病的生物防控研究。本研究采用PEG-CaCl2介导的原生质体转化法,将携带绿色荧光蛋白（Green fluorescence protein,GFP）基因的pCT74质粒分别与哈茨木霉M3和FON的基因组整合获得相应的转化子;利用激光共聚焦显微镜示踪两种转化子在西瓜植株根部的定殖,并比较二者侵染动态的差异;分别构建哈茨木霉M3和FON的实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,Real-time PCR）检测体系,利用其研究不同土壤pH值和盐质量分数对二者在西瓜植株根部定殖的影响,以期为西瓜枯萎病的高效生物防控提供理论依据。研究结果如下:1.构建哈茨木霉M3和FON的GFP标记体系。M3和FON对潮霉素B的耐受浓度分别为1000 μg/mL和150 μg/mL。M3在崩溃酶处理2.5h时原生质体产量最高,FON在崩溃处理2 h时原生质体产量最高。构建的转化子连续传代6次仍能发出绿色荧光且荧光强度稳定,能够稳定遗传,经PCR验证GFP基因转入成功。2.明确哈茨木霉M3和FON的定殖动态的差异。转化子M3-GFP和转化子FON-GFP的生物学特性与野生型无明显差异。转化子M3-GFP的生防能力及转化子FON-GFP的致病性未发生显著性改变。盆栽试验中,两种转化子均能成功定殖于西瓜植株根部,在定殖初期,FON的侵染速度快于哈茨木霉M3。3.构建哈茨木霉M3和FON的Real-time PCR检测体系。利用引物2F2/2R2和Fon-1/Fon-2在Real-time PCR技术下对M3和FON基因组DNA的最低检测量均为1 ×10-5ng/μL,为常规PCR的 1000 倍。M3 和 FON 的 DNA 标准曲线分别为y1=17.12-3.27x（R2=0.99857）和 y2=16.75-3.17x（R2=0.99484）,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系。应用Real-time PCR检测体系可以有效检测M3和FON在西瓜幼苗根部的DNA含量。4.明确不同土壤pH值和盐质量分数对哈茨木霉M3和FON在西瓜植株根部定殖的影响。pH 7、盐质量分数0.12%的土壤最适宜M3的定殖;pH 6、盐质量分数0.12%的土壤最适宜FON的定殖。M3对西瓜植株根部FON的定殖具有较强的抑制作用,且随着定殖时间的增加而显著增加。pH 6～7、盐质量分数0.08%～0.12%的土壤环境中,哈茨木霉M3的生防效果最佳,土壤pH值较盐质量分数对其生防作用的影响更大。