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目的：建立体外健康成人外周血单核细胞来源的gammadelta T细胞(γδT cel ls）培养体系，观察参芪扶正注射液（Shenqi Fuzheng Injection，SFI）对外周血细胞因子诱导的γδT细胞表面标志物表达的影响以及杀伤肺癌A549肿瘤细胞株的影响。 方法：无菌条件下采用密度梯度离心法从健康成人外周血中分离获得单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），用白细胞介素-2（rhI L-2）、唑来膦酸（zoledronic acid，Zol）诱导扩增γδT细胞；于培养的第0、4、7、10天采用直接细胞计数法观察γδT细胞的增殖速度；收集培养10天的γδT细胞，用流式细胞仪检测细胞表面标志物表达；于第10天体外培养的γδT细胞培养体系内加入不同浓度的参芪扶正注射液（SFI），分别记为SFI-γδT-Ⅰ组（1μl/ml）、SFI-γδT-Ⅱ组（10μl/ml）、SFI-γδT-Ⅲ组（100μl/ml）以及空白对照组（0μl/ml）。培养48h后用流式细胞仪检测其表面标志物表达；MTT法检测不同浓度的参芪扶正注射液对外周血来源的γδT细胞杀伤肺癌A549细胞株的影响。 结果：①成功在体外扩增健康成人外周血单核细胞来源的γδT细胞。②γδT细胞形态观察：从健康成人外周血分离单核细胞，置于37℃、5%CO2培养箱中培养。刚分离出来的单个核细胞呈圆形，单个散落，悬浮生长，大小均匀，折光性一致，培养24h后可见贴壁生长细胞，并且，出现集落，48h后集落开始变大，培养第7天时，细胞的数量明显增多。培养10天可见大的集落和单个贴壁生长细胞，也有部分呈悬浮生长的细胞，并且持续达到高峰状态，说明经白细胞介素-2（rh IL-2）、唑来膦酸（Zol）诱导可以得到大量的γδT细胞。③γδT细胞表面标志物表达分析：健康成人外周血来源的单个核细胞经10天诱导后，流式细胞仪分析γδT，其细胞的纯度（Anti-TCR-γδ）、CD3+、CD107a+、CD44+所占百分均显著提高；健康成人外周血来源的γδT细胞的纯度（Anti-TCR-γδ）（54.22±2.91）%、C D3+（99.08±0.21）%、CD107a+（45.51±11.75）%、CD44+（97.72±2.55）%。④于第10天体外培养的γδT细胞培养体系内加入不同浓度的参芪扶正注射液，培养48h后，经流式细胞仪分析γδT细胞，Anti-TCR-γδ、CD3+、CD107a+、CD44+表达情况：SFI-γδT-Ⅰ组（1μl/ml）：Anti-TCR-γδ（55.39±6.35）%、CD3+（92.01±2.88）%、CD107a+（59.65±8.38）%、CD44+（91.10±2.68）%；SFI-γδT-Ⅱ组（10μl/ml）：Anti-TCR-γδ（66.83±5.69）%、CD3+（92.68±1.66）%、CD107a+（69.65±10.30）%、CD44+（91.01±5.20）%；SFI-γδT-Ⅲ组（100μl/ml）：Anti-TCR-γδ（37.23±4.17）%、CD3+（80.79±4.14）%、CD107a+（63.06±11.37）%、CD44+（83.64±3.30）%；对照组（0μl/ml）：Anti-TCR-γδ（54.76±4.11）%、CD3+（90.70±4.97）%、CD107a+（49.25±3.97）%、CD44+（91.31±5.28）%。不同浓度的参芪扶正注射液对γδT细胞表面标志物Anti-TCR-γδ、CD3+、CD107a+、C D44+表达情况不同，适量的参芪扶正注射液能够提高γδT细胞的纯度，促进CD107a+的表达。⑤MTT法检测参芪扶正注射液对外周血γδT细胞杀伤肺癌A549细胞株的影响：加入不同浓度的参芪扶正注射液在效靶比为20：1时，对γδT细胞杀伤肺癌细胞A549的影响不同，浓度为10μl/ml的参芪扶正注射液对外周血γδT细胞杀伤肺癌细胞A549的能力高于对照组（浓度为0μl/ml）和其他二组（P＜0.05），说明一定浓度范围的参芪扶正注射液能够促进γδT细胞杀伤肺癌细胞A549，最佳浓度为10μl/ml。 结论：浓度为10μl/ml的参芪扶正注射液可以促进γδT细胞的纯度和CD107a+表面标志物表达，并且可以提高健康成人外周血γδT细胞对肺癌细胞A549的杀伤能力。