大鼠前腭缝牵张成骨及复发过程中骨保护素及其配体表达的研究

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目的研究骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)和细胞核因子KB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)在大鼠前腭缝牵张成骨牵张期和复发期组织改建过程中的表达变化及意义。方法将120只6周龄雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,每组60只。实验组大鼠建立前腭缝牵张模型,对照组不予处理。分别于实验第1、3、5、7、14天处死实验组、对照组大鼠各6只,其中3只取前腭缝标本制作石蜡切片用于HE染色、RANKL和OPG免疫组织化学染色,Image-Pro Plus 6.0软件测量分析前腭缝宽度变化;另外3只取前腭缝软骨进行实时荧光定量PCR检测RANKL mRNA和OPG mRNA的表达并计算RANKL/OPG比值。在实验第14天撤除剩余大鼠的牵张装置,进入复发期。于实验第15、17、19、21、28天处死大鼠,处理同前。结果1实验组大鼠体重在术后第1天下降,从第3天开始实验组、对照组大鼠体重增长增加量无显著性差异(p>0.05)。2在牵张期前腭缝宽度从100%增至339%,复发期降至147%,复发率为52.80%。3 HE染色显示了腭前缝扩张成骨的连续组织学改建过程。在牵张期,前腭缝两侧骨板边缘通过膜内成骨方式形成锯齿状新生骨质,在复发期部分被吸收。4 RANKL、OPG阳性表达主要定位于新生骨小梁边缘的成骨细胞、成纤维细胞及间充质细胞。5在牵张期,OPG表达增加而RANKL的表达减少(p<0.05);在复发期以RANKL表达增加为主,OPG表达稍高于对照组(p<0.05);RANKL/OPG比值在牵张期减小,在复发期增大(p<0.05)。结论本实验成功的构建了大鼠前腭缝牵张成骨及复发模型,在牵张期前腭缝骨改建以成骨为主,RANKL/OPG比值减小;在复发期,骨改建以骨吸收为主,RANKL/OPG比值增大。RANKL/OPG可能在骨缝牵张成骨中起重要的调控作用。
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