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疟疾仍然是严重危害人类健康的寄生虫病之一。疟疾感染既可表现为非重症的发热性疾病,也可发展成脑型疟、严重贫血、低血糖症、酸中毒、急性肾衰竭、黄疸、肺水肿或急性呼吸窘迫综合征等重症疟疾。重症疟疾并发症常与体内过强的免疫反应和/或疟原虫过度生长繁殖所导致的宿主免疫失衡有关。尽管目前的抗疟药物能有效地抑制疟原虫的繁殖,却不能有效地治愈这些并发症。因此,维持宿主体内的免疫平衡对控制疟疾的进程有着非常重要的意义。大量的流行病学调查研究显示,疟疾流行区和肠道蠕虫流行区存在地理分布上的重叠,疟原虫和蠕虫的共感染在世界范围内广泛存在,尤其是非洲、南美洲和东南亚的贫困地区。疟原虫和蠕虫共感染会影响宿主对寄生虫的易感性和宿主的免疫调控。目前有关疟原虫和蠕虫共感染的研究主要集中于流行病学调查,而有关共感染的寄生虫间的相互作用以及这些相互作用对疟疾患者造成的影响及可能涉及到的免疫病理机制则少有报道。研究目的:本研究通过建立旋毛虫(Trichinella spiralis,Ts)和伯氏疟原虫(Plasmodium berghei ANKA,PbANKA)共感染昆明小鼠模型,探究Ts共感染对PbANKA感染小鼠肝脏免疫病理和小肠免疫反应的调节作用。方法:1.实验分组:100只SPF级雌性昆明小鼠(6-8周,体重18～22g),随机分成4组(n=25),即正常组、旋毛虫单感染组(Ts组)、伯氏疟原虫单感染组(Pb组)和旋毛虫+伯氏疟原虫共感染组(Ts+Pb组)。正常组不做任何实验处理;Ts组口饲感染20条旋毛虫幼虫;Pb组腹腔注射感染1×106个PbANKA寄生的红细胞;Ts+Pb组于口饲感染20条旋毛虫幼虫9天后,再经腹腔注射感染1×106个PbANKA寄生的红细胞。2.每天观察小鼠的生存情况,且从PbANKA感染后第3天开始检测小鼠的体重和外周血红细胞感染率。3.在小鼠感染Ts后第22天和/或感染PbANKA后第13天取各组小鼠的肝和脾,进行肝和脾指数、肝脏生化指标谷丙转氨酶(alanineaminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、肝脏组织虫荷和组织病理检测;肝脏和脾脏的免疫组化染色[半乳糖凝集素(galectin,Gal)-1、Gal-3、中性粒细胞弹性蛋白酶和CD68+巨噬细胞]。采用qRT-PCR检测各组小鼠肝、脾嗜酸性粒细胞相关细胞因子和炎症相关细胞因子的mRNA表达水平。4.在小鼠感染Ts后第22天和/或感染PbANKA后第13天取各组小鼠的脾脏,采用qRT-PCR检测各组小鼠CD200/CD200R信号通路mRNA的表达水平。5.在小鼠感染Ts后第22天和/或感染PbANKA后第13天取各组小鼠的小肠组织,采用qRT-PCR检测各组小鼠M1和M2型巨噬细胞标记物mRNA的表达水平。6.在小鼠感染Ts后第22天和/或感染PbANKA后第13天分离各组小鼠的腹腔巨噬细胞,进行透射电镜观察和Gal-1、Gal-3以及巨噬细胞极化标记物的mRNA表达水平的检测。结果:1.体内实验结果表明,Ts共感染对PbANKA感染小鼠的生存率没有影响,但可显著降低PbANKA感染小鼠外周血红细胞的感染率和肝脏组织虫荷,显著增加PbANKA感染小鼠的肝脏和脾脏指数以及肝脏病理损伤,显著升高肝、脾Gal-1和Gal-3的mRNA和蛋白表达水平,显著增加肝、脾中性粒细胞和CD68+巨噬细胞的数量。2.Ts共感染可显著升高PbANKA感染小鼠肝、脾炎症因子的mRNA表达水平。3.Ts共感染可显著升高PbANKA感染小鼠脾脏CD200/CD200R信号通路mRNA的表达水平。4.Ts共感染可显著升高PbANKA感染小鼠小肠组织M2型巨噬细胞标记物[C型甘露糖受体 2(mannose receptor,C type 2,Mrc-2)和类几丁质酶 3(chitinase-like 3,Ym1)]的mRNA表达水平。5.体外实验结果表明,Ts共感染可显著升高PbANKA感染小鼠腹腔巨噬细胞Gal-1、Gal-3和巨噬细胞M1型极化标记物的mRNA表达水平。结论:1.Ts共感染没有影响PbANKA感染小鼠的生存率,但可显著降低PbANKA感染小鼠外周血红细胞感染率和肝脏中的虫荷量,显著加重PbANKA感染小鼠肝脏的免疫病理损伤。2.进一步的研究发现,Ts共感染可显著增加PbANKA感染小鼠肝、脾的中性粒细胞弹性蛋白酶和CD68+巨噬细胞的表达,显著增加肝、脾Gal-1和Gal-3以及促炎因子的表达。提示Ts共感染可增强PbANKA感染小鼠对抗疟原虫的免疫反应,通过激活免疫细胞如巨噬细胞和中性粒细胞对疟原虫进行杀伤和清除,同时产生大量炎症因子加重对自身器官的免疫损害。3.Ts共感染可调节PbANKA感染小鼠小肠组织的免疫反应,促使其小肠组织的巨噬细胞向M2型极化。4.本研究探讨了Ts共感染对疟疾结局的影响,研究结果为了解蠕虫和疟疾共同流行地区疟疾的发病机制具有重要意义。