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本论文以探讨“植物美登木素的生物合成起源”为切入点,以云南美登木为实验材料,从植物细胞培养及其化学成分、共生微生物的分离及其化学成分和饲喂或植物-共生微生物共培养三个方面开展了研究,取得了一些有意义的结果。
从云南美登木愈伤组织和悬浮细胞培养中分别分离鉴定了5个化合物和9个化合物,大部分化合物与同属植物中分离到的成分相同/相似,其中有一个新二降木栓烷型三萜 (Fig. A)。从云南美登木的不同部位共分离了21株放线菌、6株真菌和2株细菌,活性结果表明,其中5株菌株的发酵提取物表现较好的抗真菌活性;从菌株CS、1B1、3C的发酵提取物中共分离鉴定了19个化合物包括10个新化合物,分别属于bafilomycins、naphthomycins、angucycline和I型二酮等 (Fig. A)。从橙色束丝放线菌的固体发酵培养物中分离鉴定了绊环丝裂霉素酰胺氮甙,该化合物是次生代谢产物中的第一个酰胺N-苷以及5个非常见碳水化合物包括4个C-2位去氧己糖和1个呋喃衍生物,它们都是首次从该菌中分离得到 (Fig. A)。从美登木细胞与共生放线菌7B的共培养实验中分离鉴定了一个新二降三萜CE3 (Fig. A);在植物细胞-微生物共培养、水杨酸、几丁质和茉莉酮酸甲酯诱导实验中均没有分离和用LC-ESI-MS检测到美登木素类化合物,但是发现共培养系和水杨酸诱导实验都产生相同的三羟基脂肪酸9,12,13-三羟基十八碳-10-烯酸,提示云南美登木植物细胞对伤信号和放线菌可能有相似的反应-防御机制。
对部分化合物的抗菌和抗肿瘤活性进行了测试,发现了一些活性较好的化合物。其中最为突出的是,大环内酯CSN3具有广谱抗菌和强抗肿瘤细胞活性;萘霉素A和绊环丝裂霉素酰胺氮甙P-2有较好的抗真菌和抗肿瘤细胞活性。
还通过13C-标记的桂皮酸、莽草酸和乙酸钠饲喂实验对部分化合物的生物合成途径进行了研究,初步结果表明化合物L-3是通过I型多酮途径合成的最小聚酮-二酮。
综合本学位论文的实验结果和前人的有关研究成果得出以下结论:①云南美登木组织培养和悬浮细胞培养系不能独立产生美登木素类化合物,“植物美登木素可能是共生微生物来源”并应当强调是“植物-微生物相互作用的结果”,并认为基于植物-微生物相互作用机制所设计的植物共生菌的培养或植物-共生微生物的共培养实验并能够从中分离得到植物美登木素类化合物将是回答“植物美登木素生物合成起源”的关键。;②植物共生菌是产生结构新颖活性化合物的重要来源;③植物-微生物共培养将可能是产生活性化合物的有效途径之一。