高效液相色谱是分析化学中发展最快、应用最广泛的领域之一，其分离特性使之成为在环境化学、生物学、毒物学和临床化学等诸多领域中被广泛采用的一种有效分离手段。由于化合物本身性质和检测手段的限制，并非所有物质都能够直接用于色谱分析，为此利用化学衍生化反应达到改变目标化合物的物理化学性质后，使其能够进行特定的色谱分析是本文研究的目的。 尽管目前已发展出许多种荧光试剂，但在实际应用中都存在这样或那样的缺点。本文首次对9-（2-羟乙基）-吖啶酮和9-吖啶酮基-（α-甲基）-乙酸等几种新型的高灵敏荧光试剂与胺类、羟基化合物及羧酸类化合物的衍生化反应及其衍生产物在高效液相色谱中的分离进行了系统的研究。选择了最佳流动相体系，对影响衍生化反应的各种因素（反应温度、反应时间、缩合剂及催化剂用量）进行了考察，并对反应条件进行了优化；对不同衍生方法的结果进行了比较研究及讨论；此外，还将这几种荧光试剂首次应用于氨基酸，胆汁酸等复杂样品的分离以及海水等实际样品中成分的测定，取得了较满意的结果。 实践证明，与现存的一些荧光试剂相比，这几种新型的高灵敏荧光试剂与胺类，羟基化合物及羧酸类化合物的衍生化反应条件温和，简单易操作；衍生反应产率高，衍生产物的性质稳定，易于分离；反应副产物不影响被分析物的分离测定。可应用于多种化合物的高效液相色谱—荧光测定。