论文部分内容阅读
小金胶囊起源于清代乾隆年间,由人工麝香、制草乌、木鳖子、枫香脂、乳香、没药、当归、五灵脂、地龙及香墨十味药以一定比例配伍而成,具有散结消肿、化淤镇痛等功效。临床上用于乳腺增生、甲状腺结节、乳腺癌、前列腺增生等疾病的治疗。然而,小金胶囊的体内成分尚未研究,主要成分体内的药代动力学特征尚未明确。这些基础研究的缺乏,限制了小金胶囊作用基础的进一步阐释,更阻碍了小金胶囊的产业化与国际化。目的:本研究以疗效明确的中药复方小金胶囊为研究对象,基于“中药血清药物化学理论”研究小金胶囊吸收入血的原型成分及其代谢产物,阐明小金胶囊的体内物质基础;基于大鼠乳腺增生模型,研究小金胶囊多成分的体内变化规律,为临床药物应用与监测提供科学依据。全文基于中药复方体内化学成分研究,以期为小金胶囊的现代化研究提供一定的参考,从而使小金胶囊在临床上更大程度地发挥疗效,更好地造福于广大患者。方法:（1）采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MSE）结合UNIFITM软件的多数据处理方法对小金胶囊移行入血成分进行全面表征。通过检索数据库及查阅相关文献建立小金胶囊化学成分数据库,将自建数据库导入UNIFI软件,并将给药血样、空白血样质谱数据导入软件,根据小金胶囊化学成分的准确分子量,并与标准品及文献数据的对比从而快速筛选入血原型成分。在入血原型成分明确的基础上,采用UPLC-Q-TOF-MSE结合UNIFITM软件的代谢产物预测功能,对小金胶囊的体内代谢产物进行定性研究。（2）以HPLC-MS/MS为检测仪器,建立同时检测6种小金胶囊入血原型成分（乌头原碱、准噶尔乌头碱、里奥林、AKBA、KBA、蚯御素）的生物样品分析方法。（3）雌性SD大鼠通过注射雌激素（苯甲酸雌二醇、黄体酮）建立乳腺增生模型,小金胶囊单次灌胃给药后,在预设的时间点眼底静脉丛采血,HPLC-MS/MS方法测定不同时间点大鼠体内6种原型成分的血药浓度,应用DAS 2.0软件计算主要药动学参数,阐述小金胶囊主要药效成分在乳腺增生模型大鼠体内的动态变化规律。结果:（1）建立了小金胶囊各单味药材总共850种化学成分数据库,经UNIFI平台数据匹配处理,最终从小金胶囊给药大鼠血清中共鉴定包括生物碱类、三萜酸类、呋喃磺酸类等28种原型成分。随后,经UNIFI数据处理平台的代谢产物预测功能,选取相应的Ⅰ相以及Ⅱ相代谢反应类型,最终鉴定出29种代谢产物。入血成分在体内的主要代谢反应为脱乙酰基化、脱水、氧化、葡萄糖醛酸化、磺酸化等;（2）建立的同时测定6种小金胶囊入血原型成分的HPLC-MS/MS的分析方法,经方法学考察后表明该方法灵敏、稳定可行。（3）研究发现,三种乌头碱类生物碱虽然结构类似,但在药代动力学参数却表现出明显的不同,准噶尔乌头碱出现双峰现象。AKBA、KBA均为五环三萜酸类化合物,与AKBA相比KBA表现出更快的吸收与消除速率,但都出现双峰现象。本研究是首次表征蚯御素在大鼠体内的药代动力学特征,在体内检测出较高的浓度,给药后2.125 h达到药峰浓度,24 h完全清除,表现出双峰现象。结论:本研究通过小金胶囊大鼠体内成分分析,鉴定了57种入血成分,阐明了小金胶囊的体内物质基础,明确体内活性成分。建立了大鼠乳腺增生模型,阐明了乌头原碱、准噶尔乌头碱、里奥林、AKBA、KBA和蚯御素6种原型成分在大鼠体内的动态变化规律。为小金胶囊的临床合理用药提供实验数据参考。