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目的在大鼠创伤性深静脉血栓形成前、形成高峰期两个时相点,对TDVT大鼠模型股静脉组织基因芯片检测结果进行分析,重点关注血栓形成高峰期抗凝-血小板相关高表达基因HMOX-1的变化,在大鼠和人血细胞层面对静脉组织高表达基因HMOX-1分别进行Real-time PCR和RT-PCR检测,研究其在血细胞层面的表达情况。材料和方法第一部分创伤性深静脉血栓形成大鼠股静脉基因芯片检测结果分析1对Affymetrix Rat230基因表达谱芯片检测出的基因芯片数据结果采用倍数变化分析方法(两组间同一基因的Signal log2 ratio比较,上调基因:Log2 Ratio≥1,下调基因:Log2 Ratio≤-1,)筛选出差异表达的基因并进行GO分类；2以"Coagulation、Anticoagulant、platelet"为检索词在NCBI数据库、CNKI数据库中查询,并应用倍数变化分析方法筛选与凝血-抗凝系统血小板相关高表达基因(Signal log2 ratio比较,差值必须≥3或≤-3)；3将锁定的显著差异表达基因在NCBI网站的GENE中查询其在大鼠和人类中的基因序列,将两者的基因序列代入BLAST中进行比对,明确与人类基因的同源性。第二部分HMOX-1预测诊断大鼠创伤性深静脉血栓形成实验研究1采用直接钳夹大鼠双侧股静脉+双后肢人字石膏固定的方法建立创伤性深静脉血栓形成模型。依据造模时间和肉眼观察血栓形成状态,将100只实验大鼠分为4组：正常对照组(A组)、血栓形成前期组(B组)、血栓形成高峰期血栓形成组(C组)、血栓形成高峰期血栓不形成组(D组)；2针对相应时间点,每次采集每只大鼠血液标本5ml,离心获取血清及血细胞标本,采用Trizol法提取血细胞总RNA,并切取股静脉血管；3对HMOX-1进行Real-time PCR检测；对切取的股静脉血管进行组织学观察血栓形成程度。第三部分RT-PCR检测HMOX-1基因变化的临床研究临床观察,超声检查,静脉造影等相结合,在相应的时间点,采集骨科创伤及手术后深静脉血栓发生高危人群及血栓形成患者的血液,每次采集每位患者血液标本5ml,离心获取血浆及血细胞标本,采用Trizol法提取每位患者血细胞RNA,应用RT-PCR技术对上述RNA样品中HMOX-1进行测定。结果1在动物模型中,D组均无血栓形成；造模后24h,血栓形成率达56.06%(37/66)；纳入相应分组的各组血管组织肉眼和光镜的观察结果在血栓形成方面基本一致；2创伤性深静脉血栓形成过程中HMOX-1基因在不同的时相点表达量不同,具有逐渐上调表达的趋势；B组(血栓形成前期组)、C组(血栓形成高峰期血栓形成组)较A组(正常对照组)发生显著差异上调表达(BvsA:8.49、CvsA:14.76),而D组(血栓形成高峰期血栓不形成组)较A组(正常对照组)轻微上调表达(DvsA:3.21); Real-time PCR检测结果与芯片检测结果变化趋势上基本一致3 RT-PCR检测人血液中HMOX-1的结果显示：血栓形成组和无血栓组靶基因表达无明显差异结论1在大鼠创伤性深静脉血栓形成过程中HMOX-1表达变化呈动态上调趋势,监测血液中HMOX-1的变化可间接反应大鼠创伤性深静脉形成的状态2 HMOX-1作为预测诊断人深静脉血栓形成分子标志物的可能还需要扩大样本量验证研究。