核糖核酸（Ribonucleic Acid,RNA）,简称核酸,在基因转录表达和蛋白质生物合成中起重要作用,同时,RNA及降解产物也广泛应用于在食品、医药和农业等领域。目前生产RNA的方法主要从酿酒酵母和假丝酵母中提取,但是假丝酵母非食品安全酵母,酿酒酵母天然不能利用乳糖。马克斯克鲁维酵母是一株非常规酵母,具有生长速率快、代谢底物广等特点,同时又是一种生物安全（GRAS）食品级微生物,因此可用于食品行业的发酵及药物的生产。乳清是生产干酪及干酪素时产生的副产物,目前,世界上每年有上亿吨乳清产生,但其资源利用程度不高。乳清具有较高的营养价值,其总糖中主要是乳糖,因此利用好乳糖是乳清资源化利用的关键。本课题以马克斯克鲁维酵母为出发菌株,以乳糖为碳源,通过基因敲除和基因过表达影响生长速度、核糖体组装和核糖体DNA（r DNA）转录这三方面的相关基因,探究其对马克斯克鲁维酵母利用乳糖合成核糖核酸的影响。在此基础上,通过响应面法进一步进行了发酵培养基的优化。主要研究内容和结果如下:探究了提高菌体生长速度对核酸含量的影响。分别构建了过表达HXT14、HXT15基因和敲除CTT1、CTA1、HRP1、PYK1基因的工程菌株。与出发菌株相比,TY20-HXT14、TY20-?CTT1核酸含量分别提高了14.88%和8.4%,且重组菌株的生长速率也略有提高,敲除CTT1并同时过表达HXT14核酸含量提高了6.28%,但TY20-HXT15和TY20-?CTA1、TY20-?HRP1、TY20-?PYK1核酸含量并无明显变化。对重组TY20-HXT14菌株的r RNA表达量、细胞生长状态进行测定。探究了核糖体组装对核酸含量的影响（涉及基因有BRX1、RPF1、SCH9、PKAR、FHL1、IFH1）。与出发菌株相比,重组菌株TY20-BRX1、TY20-RPF1、TY20-SCH9、TY20-PKAR、TY20-FHL1和TY20-IFH1核酸含量均无明显变化。探究核糖体DNA（r DNA）的转录对核酸含量的影响。构建敲除转录抑制因子TY20-?RPH1菌株,和分别过表达转录因子TY20-RRN3、TY20-RRN5菌株,发酵结果表明,与出发菌株TY20相比,重组菌株的核酸含量与出发菌株基本一致。以TY20-HXT14作为试验菌株,其胞内核糖核酸（RNA）含量为目标,对培养基组成进行了单因素实验和响应面优化,最佳培养基配方为:乳糖14%,酵母浸粉1%、硫酸镁0.3%、磷酸二氢钾0.2%。在优化培养基的条件下,亲本菌株RNA含量达到16.65%,重组菌株TY20-HXT14 RNA含量可达到18.37%。与重组TY20-HXT14菌株相比,RNA含量由14.23%提高到18.37%,比优化前增加了29.10%。与出发菌株12.43%（培养基未优化）RNA相比,RNA含量提高了47.79%。