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目的:隔山香是课题组持续研究的特色药材,具有行气止痛、活血化瘀等功效。课题前期研究证实了隔山香中苯丙素类成分异芹菜脑对血管平滑肌的解痉药效。本课题持续关注中药止泻作用,发现腹泻的产生多与胃肠道痉挛有关,那么异芹菜脑的解痉药效也可能体现在胃肠道中。课题组前期研究发现隔山香挥发油初步显示出止泻药效,而异芹菜脑在挥发油中含量较高,因此系统考察隔山香挥发油的止泻效果及其药效物质基础具有可行性。基于上述考虑,本课题开展了隔山香挥发油的止泻药效及异芹菜脑的体内药物动力学研究,进一步阐释隔山香药材“行气止痛”的科学内涵。方法:1.隔山香挥发油的止泻作用研究。分别建立不同给药途径的番泻叶致泻模型和蓖麻油致泻模型,开展隔山香挥发油口服和贴敷给药的止泻作用研究,同时比较两种给药方式的止泻效果。2.隔山香的入血成分检测。采用UPLC-MS/MS法,开展隔山香挥发油口服给药后在大鼠血浆中的成分测定。3.异芹菜脑口服给药后在大鼠中的药物动力学研究。以α-细辛脑为内标,建立了简单、灵敏、稳定的UPLC-MS/MS生物样品分析方法;测定大鼠灌胃给药异芹菜脑混悬液(80 mg/kg)后异芹菜脑的血药浓度。结果:1.隔山香挥发油口服给药对小鼠的止泻作用结果。隔山香挥发油口服给药对番泻叶引起的大肠腹泻具有显著的止泻药效,有效止泻浓度在0.2%-4%之间;隔山香挥发油口服给药对蓖麻油引起的小肠腹泻同样具有显著的止泻效果,有效止泻浓度在0.4%-4%之间。2.隔山香挥发油贴敷给药对小鼠的止泻作用结果。隔山香挥发油贴敷给药对番泻叶引起的大肠腹泻具有显著的止泻药效,有效止泻浓度在15%-30%之间;隔山香挥发油贴敷给药对蓖麻油引起的小肠腹泻同样具有显著的止泻效果,有效止泻浓度在10%-30%之间。3.隔山香挥发油口服给药后在大鼠血浆中的成分测定结果。隔山香挥发油灌胃给药后,在大鼠血浆中检测到含量高、峰型佳、响应值大的异芹菜脑成分;异芹菜脑在隔山香挥发油中含量高达48.41%,与文献报道基本一致。4.异芹菜脑在血浆中的方法学考察结果。生物样品中的内源性物质不干扰异芹菜脑及内标的测定;在生物样品设计的浓度范围内,异芹菜脑的线性关系良好,r=0.99230;日内精密度在2.7%-4.1%之间,日间精密度在2.6%-3.1%之间;提取回收率在90.1%-96.2%之间,基质效应在88.8%-101.5%之间;生物样品在不同储存条件下均能保持稳定。5.异芹菜脑口服给药后在大鼠中的药物动力学研究结果。异芹菜脑经大鼠口服给药后,其药-时曲线在30 min和360 min出现双峰现象;半衰期为293.04±29.59 min,表明异芹菜脑在体内消除较慢,最大血药浓度(Cmax)为0.39±0.14 μ g/mL,达峰时间(Tmax)为360.00±0.00 min,表明异芹菜脑需在体内吸收时间较长一段时间才能达到峰值;AUC0-t为 269.84±77.70 μg/mL·min,AUC0→∞为282.71±81.01μ g/mL·min;平均滞留时间(MRT0-t)分别为 550.80±45.50min。结论:1.隔山香挥发油不同给药途径对两种致泻模型均具有显著的止泻药效,说明隔山香挥发油均可治疗大肠腹泻和小肠腹泻,增加了隔山香挥发油治疗腹泻的新用途,进一步丰富了隔山香的临床应用,为隔山香挥发油相关制剂的设计提供了依据。2.本研究首次建立了快速、灵敏、稳定的UPLC-MS/MS分析方法,用于异芹菜脑在大鼠血浆中的定量研究及方法学验证,其方法学考察结果符合生物样品的分析要求。研究首次报道了异芹菜脑口服给药后在大鼠中的药物动力学研究,实验出现的双峰现象可能是肠肝循环和多部位吸收并存的结果,其具体原因有待进一步研究。