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众所周知,膀胱肌组织能够产生不受神经系统控制的自发性动作电位,但目前其机制尚未明了。前期的研究中已经证实了膀胱存在ICC,简单记录了Ih电流。这些结果都不能证实ICC在膀胱中到底起到何种作用。Ih电流（在心脏称为If电流）在胃肠道和心脏窦房结的研究中被认为是“起搏电流”,而HCN通道是Ih电流的分子基础。我们前期的系列研究中已经提示ICC上可能存在HCN通道,但是其电生理特征还尚未明确。同时,既往的实验方法中采用培养的ICC进行电生理实验,效果并不理想,其主要原因是培养后的ICC进行膜片钳实验时难度很大,而且其所测参数并不一定代表了真实生理状态下的情况。因此本实验的目的:建立一套稳定、可靠的急性分离方法以获得活性更好的ICC;观察ICC上HCN通道的表达,完善HCN通道基本的电生理参数,为进一步的研究提供实验基础和理论依据。主要实验结果与结论如下:1.建立了稳定可靠的急性分离方法,所得到的细胞经免疫组织化学实验方法确认是ICC;其酶消化方案为:Ⅱ型胶原蛋白酶2.0mg/ml,胰酶抑制剂2.0mg/ml,木瓜蛋白酶1.0mg/ml,BSA1.0mg/ml,其消化时间15min。2.采用c-Kit和HCN抗原的免疫荧光双标法,证明了c-Kit阳性的ICC细胞上具有HCN通道抗原的阳性表达。3.ICC上记录到了Ih电流,其激活电压位于-140mV～－90mV之间,电流幅度为300-800pA,具有电压依赖性,并能被ZD7288（20μM）和Cs～＋（500μM）阻断。4.Ih电流反转电位42±2mV,PNa/PK为0.42,膜电容为10-40pF;胞外ZD7288阻断Ih电流具有浓度依赖性,其IC50为24.7±6.5μmol/L,且其阻断效应不可逆;胞外Cs+阻断Ih电流具有浓度依赖性,其IC50为232.5±24.8μmol/L,且其阻断效应可逆。5.胞外钠钾对HCN通道皆有影响,具有浓度依赖性,其浓度的改变会影响HCN通道的激活和电导;胞外给予TTX、TEA及Ba2+对Ih电流无明显影响。6.胞外钙可明显影响HCN通道的激活时间,具有浓度依赖性;胞内cAMP可影响HCN通道的激活时间,具有浓度依赖性。