第一部分WHSC1基因条敲小鼠的获得及表型研究
　　目的：为了研究WHSC1基因缺失对小鼠生殖的影响，条件性敲除雄性小鼠生殖细胞中WHSC1基因，为男性不育的诊断和治疗提供潜在的研究靶点。
　　方法：Cre重组酶是经典的位点特异性重组酶，可以介导两Loxp位点间的特异性重组，本研究中采用基因编辑技术CRISPR/Cas9联合Cre-LoxP重组酶系统转基因小鼠(Stra8-cre转基因小鼠)，在SPF级动物实验室进行交配，以获得生殖细胞中条件性敲除了WHSC1基因的雄性小鼠.基因型鉴定获得实验组与对照组小鼠，冰冻切片、免疫组化确定小鼠条敲模型成功.进行生育力测试，并进一步通过睾丸和附睾石蜡切片染色，评估基因敲除对雄性生殖系统的影响。
　　结果：1.雄性小鼠生殖细胞特异性敲除WHSC1后，成年小鼠睾丸和附睾明显变小，生精小管平均直径变小，甚至局部出现空泡化；2.附睾内精子数量大幅减少，平均窝产仔数量显著减少，生育力显著降低。
　　结论：雄性生殖细胞中成功条件性敲除WHSC1基因，而该基因缺失会导致雄鼠的生育能力、睾丸及附睾发育、精子形态结构、精子活力以及精子的顶体等产生异常。
　　第二部分WHSC1基因在精子发生过程中的作用研究
　　目的：探索WHSC1基因缺失对精子发生影响的机制，为少弱精子症的男性群体提供新的诊疗思路。
　　方法：在第一部分研究的基础上，通过酚氯仿抽提小鼠睾丸RNA测序，探索WHSC1基因发挥功能可能的下游途径，同时使用冰冻切片研究WHSC1可能介导的组蛋白修饰H3K36me2，H4K16ac的变化，并进一步对精子涂片进行形态检测以及PNA等标志性蛋白的免疫荧光定位分析。
　　结果：1.WHSC1敲除后，RNA-seq显示大部分与精子发生相关的基因表达变化不明显；2.相对于对照组，WHSC1条件性敲除小鼠睾丸曲细精管的各级生精细胞H3K36me2的表达水平均出现显著下调；3.WHSC1条件性敲除小鼠睾丸圆形精子细胞及延长期精子细胞H4K16ac程度明显增多；4.WHSC1条件性敲除会导致小鼠精子头部形态异常。
　　结论:WHSC1通过催化H3K36me2修饰调节精子发生相关表观遗传过程而非基因表达网络，调控正常的精子发生.WHSC1基因抑制H4K16过度乙酰化，从而抑制过量的鱼精蛋白整合到精子基因组上。