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研究背景:睾酮(Testosterone,T)主要由睾丸间质细胞产生,是一种在男性生育维持、生长发育、和物质代谢等生理过程中发挥着关键作用的类固醇激素。流行病学研究显示青少年和年轻成年男性的睾酮水平较十年前下降显著。睾酮的缺乏导致男性性功能障碍,加速人体器官的衰老,诱发全身性疾病的发生,从而严重影响其生活质量。探讨睾酮缺乏的机制及潜在的治疗方法具有重要意义。多不饱和脂肪酸是多种生命活动所需的营养物质,具有多种优异的生理功能。大豆油是日常生活中非常普遍的食用油,大豆油富含ω-6多不饱和脂肪酸亚油酸(linoleic acid,LA),也是ω-3多不饱和脂肪酸α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)的重要来源。花生四烯酸(arachidonic acid,AA)是另一种ω-6多不饱和脂肪酸,在动物脂肪、红肉、鸡蛋等食物中含量丰富。随着膳食结构的改变,大豆油和富含花生四烯酸的食物摄入量逐渐增加。然而,膳食中大豆油和花生四烯酸摄入增加对睾酮产生的影响目前尚不清楚。目的:本研究采用分别添加大豆油与富含花生四烯酸油的饲料喂养小鼠,探究增加摄入大豆油或花生四烯酸油对小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响。方法:1.构建小鼠模型,6-7周龄的雄性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后随机分为三组:①普通饮食组(ND组);②大豆油组(SOY组):在普通饲料基础上添加20%大豆油;③花生四烯酸组(AA组):在普通饲料基础上添加20%花生四烯酸油。2.喂养16周后处死小鼠:①使用全自动生化分析仪检测血糖(Glu),血清低密度脂蛋白(LDL-C),高密度脂蛋白(HDL-C),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)的水平。②利用SSA-Ⅱ系统对小鼠各项精子参数进行检测分析。③H&E染色观察睾丸组织形态。④ELISA方法检测血清黄体生成素(luteinizing hormone,LH)与睾酮水平。⑤利用气相色谱分析的方法检测小鼠血清、睾丸组织的脂肪酸成分。⑥Western Blotting、RT-PCR、免疫组化技术检测小鼠黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体(LHCGR)的表达、定位情况。⑦RT-PCR技术检测转录因子类固醇生长因子-1(SF-1)的表达情况。⑧Western Blotting、RT-PCR技术检测小鼠睾酮合成关键酶:类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17α-羟化酶(CYP17A1)、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达情况。结果:1.喂养1 6周后,与ND组小鼠相比,SOY组与AA组小鼠体重、睾丸重量、睾丸系数无统计学差异。与ND组小鼠相比,SOY组与AA组小鼠LDL-C、HDL-C、TG、TC与血糖水平无统计学差异。2.与ND组小鼠相比,SOY组小鼠血清LH、T水平升高,AA组小鼠血清LH水平升高。3.气相色谱分析显示,与ND组相比,SOY组小鼠血清中的LA、ALA含量显著升高,棕榈酸(PA)含量降低,AA组小鼠血清和组织中的AA含量显著升高。4.与ND组小鼠相比,SOY组与AA组小鼠LHCGR水平上调。5.与ND组小鼠相比,SOY组小鼠转录因子SF-1水平上调。6.与ND组小鼠相比,SOY组小鼠StAR、CYP11A1表达增加,AA组小鼠StAR表达增加。7.与ND组小鼠相比,SOY组小鼠精子总活动率(PR+NP)升高,SOY与AA组小鼠的精子浓度、具有前向运动的精子数(PR)无明显变化。结论:增加摄入大豆油提高了血清中LA、ALA水平,降低了 PA水平,LH分泌增加,LHCGR上调,提示:大豆油摄入增加,可能通过改变血清脂肪酸成分,激活了 LH/LHCGR通路,上调转录因子SF-1,促进下游睾酮合成关键酶StAR、CYP11A1的表达,睾酮水平升高。花生四烯酸油摄入增加具有相似的效应,但睾酮的增加没有统计学意义。本研究提示,增加摄入大豆油通过LH/LHCGR/T通路,促进睾酮的合成。