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目的:观察调Q Nd:YAG激光(波长1064nm,以下简称Q-1064nm)治疗色沉豚鼠后不同温度冷敷对皮肤组织热损伤及色素沉着的影响。通过观察分子机制的变化初步探究不同冷敷温度对激光术后皮肤保护的意义,为临床激光治疗后的皮肤冷却措施提供指导及一定理论依据。方法:选择10只棕黄花色豚鼠作为实验对象。选取豚鼠背部棕黄色毛发区域剔除毛发,暴露皮肤,采用窄波紫外线(narrow band ultraviolet B,NB-UVB)照射豚鼠背部裸露皮肤诱导色素沉着(照射参数:0.9J/cm2、1次/周、共3周),每只豚鼠总共照射剂量为2.7J/cm2,使之形成稳定的色素沉着。色沉形成后,对此区域进行1次Q-1064nm激光治疗,能量密度为5.0J/cm2,光斑直径为4mm。将每只实验豚鼠背部Q-1064nm激光治疗后区域由左至右分为3个区域,随机分为3组。0℃组即激光治疗后即刻给予0℃冰敷20min;8℃组即激光治疗后给予即刻8℃冷敷20min;对照组即激光治疗后不给予任何处理。所有治疗处理均在室温(20~23℃)下进行。分别对色素沉着形成前后,激光治疗皮肤冷却处理后即刻、1周、2周进行照片拍摄,于治疗后1周、2周时进行皮肤组织取材。肉眼观察豚鼠皮肤大体改变情况,将取材组织分别进行HE染色、Fontana-Masson银染色、热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP 70)及α-黑色素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)免疫组织化学染色。评价各组豚鼠在激光治疗后进行皮肤冷却后组织结构改变以及HSP70、黑色素颗粒、α-MSH表达量的变化情况。结果:肉眼观察豚鼠实验区域皮肤变化,NB-UVB照射后皮肤呈黑褐色,颜色分布较均匀。Q-1064nm激光治疗后进行即刻冷敷后,3组豚鼠皮肤颜色略微发红。对照组皮肤组织可见少量红斑及红肿,0℃组与8℃组均未见明显红斑,红肿程度较对照组轻。治疗后1周时0℃组与8℃组痂皮脱落面积大于对照组。治疗后2周时0℃组与8℃组皮肤颜色较对照组明显变浅。1冷敷与热损伤修复1.1 HE染色观察组织切片显示对照组治疗后1周时细胞排列较紊乱,部分细胞呈现空泡状,不能明显区分表皮细胞层次。组织内可见明显红细胞溢出及炎细胞浸润。0℃组与8℃组细胞排列明显较对照组整齐,可区分表皮层次结构。0℃组与8℃组可见炎细胞浸润,未见明显红细胞;治疗后2周时皮肤组织细胞排列整齐度、红细胞溢出、炎细胞数量及分布等情况均较治疗后1周有所改善。0℃组与8℃组皮肤组织细胞排列较整齐,可见少量炎细胞分布,未见红细胞。对照组表皮细胞层次较紊乱,炎细胞数量较同期0℃组与8℃组数量多,可见少量红细胞。1.2免疫组织化学染色法测HSP70的表达量,显示0℃组与8℃组表达量在治疗后1周和2周均低于对照组,差异存在统计学意义(P<0.05)。治疗后1周时0℃组与8℃组比较无差异(P>0.05),治疗后2周时8℃组表达量高于0℃组,差异有统计学意义(P<0.05)。时间与组间存在交互效应。2冷敷与色素沉着改变2.1 F-M银染色可见紫外线照射豚鼠裸露皮肤后较照射前表皮黑色素颗粒大量增加,紫外线照射前后黑素颗粒含量差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后2周3组黑素颗粒表达量较治疗后1周均有所降低。8℃组与0℃组黑素颗粒含量同期均比对照组表达少,差异有统计学意义(P<0.05)。8℃组表达量均较同期0℃组少,差异有统计学意义(P<0.05)。2.2免疫组织化学染色法测α-MSH的表达量,显示与黑素颗粒表达量呈同样趋势。治疗后1周、2周8℃组与0℃组α-MSH表达量均比对照组表达少,差异有统计学意义(P<0.05),同期8℃组表达量均较0℃组少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.Q-1064nm激光治疗色素沉着皮肤后即刻进行接触式皮肤冷却可减轻激光治疗产生的热损伤,促进损伤组织修复;2.在Q-1064nm激光治疗色素沉着皮肤疾病后,即刻进行接触式皮肤冷却可减少表皮黑色素,具有协同激光减轻色素沉着的作用;3.8℃冷敷较0℃冰敷对于Q-1064nm激光治疗色素沉着皮肤疾病的术后皮肤保护及恢复的效果更佳。