蒙古绵羊Bcl-2/Bax基因cDNA的克隆及序列分析

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YFY2006
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Bcl-2基因(即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)是一种原癌基因,近年的研究证明它具有抑制凋亡的作用。已经发现的Bcl-2蛋白家族按功能可分为两类,一类是象Bcl-2一样具有抑制凋亡作用,而另一类象Bax具有促进凋亡作用。本研究首先根据反刍动物的Bcl-2和Bax cDNA的保守序列设计引物,从绵羊脾组织中提取总RNA,采用RT-PCR(Reverse Transcription PCR)技术扩增出Bcl-2和Bax cDNA的中间片段,接着采用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法,成功的扩增了绵羊的Bcl-2 cDNA全序列。Bax中间序列长134 bp,Bcl-2 cDNA全序列长806bp,其中包含687bp的开放读码框(Opening Reading Frame,ORF),109 bp的3′非翻译区(3′UTR)以及poly(A)15,该ORF编码229个氨基酸残基。核酸序列及氨基酸序列的同源性分析表明:蒙古绵羊Bcl-2与牛的Bcl-2同源性最高,与猫、人、犬、鼠的Bcl-2之间的同源性次之,与鸡的Bcl-2同源性最低。说明蒙古绵羊Bcl-2无论是核酸序列还是氨基酸序列,在进化关系上与反刍动物的Bcl-2最近,与鸡的较远。
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