免疫是保护机体防止感染的一种状态，包括先天性免疫和获得性免疫，其中先天性免疫是机体应对感染的第一道防线，相对于获得性免疫，其特异性较差，但反应迅速，这种高效的防御机制能够抑制大部分病原体感染的发生。先天性免疫通过PRRs识别病原微生物存活所必须的PAMPs。目前已经发现四种不同的PRRs家族，包括TLRs，CLRs，RLRs和NLRs。病毒双链RNA（dsRNA）是众多PAMPs中的一类，它可以通过两种途径被区分和识别。TLR3可以识别细胞外或吞噬进入内涵体中的dsRNA；RIG-I/MDA-5能够识别病毒在细胞内复制过程中产生的dsRNA。RIG-I/MDA5一旦与配体dsRNA结合，激活形成一个大的信号复合体，其中包括MAVS，TRAFs，TBK1，IKKε等。接着转录因子NF-κB，IRF3/IRF7和ATF/c-Jun将被激活，诱导表达TNF-α和IL-6等促炎性因子以及IFN-I。蛋白质的泛素化修饰参与细胞的各种生理过程，包括先天性免疫过程中信号级联反应的传递。通过泛素Lys-48位连接的多聚泛素化修饰主要负责细胞内特定蛋白质通过泛素蛋白酶体途径降解，从而将细胞内多余的特定蛋白质降解，这种降解方式至少需要目标蛋白质上4个泛素分子发生Lys48位连接。泛素Lys-63位连接的多聚泛素化并不参与蛋白质的降解，这种多聚泛素化广泛参与细胞内的各种生化反应过程，如DNA损伤修复，蛋白质复合体的招募，蛋白激酶的活化和染色质的动态变化等。特别是先天性免疫过程中，信号通路的级联传递，信号复合体的招募和蛋白质活性的调节都需要不同形式的泛素化修饰来进行调控。某些蛋白质序列中存在泛素结合结构域（UBDs），它是指能够与泛素分子非共价结合的氨基酸序列。这类蛋白质可以通过结合和调节泛素化蛋白质，参与细胞内的各种生理过程。越来越多的证据表明，在先天性免疫系统中，此类蛋白质对于信号通路的调节发挥着及其重要的作用。病毒感染过程中，RLRs能够识别病毒的不同组分，使细胞产生应答，激活不同转录因子，转录和翻译各种干扰素分子和促炎性因子，这些因子能够参与病毒的清除，但是如果免疫反应过度，反而损伤自身机体组织，因此适度的控制免疫反应是保护机体的重要机制之一，但是如何精确调控病毒免疫反应有待于进一步阐明。为了鉴定新的可能参与RIG-I/MDA5介导的NF-κB和IRFs激活过程的包含UBD结构域的蛋白质分子，我们设计了一系列针对这类蛋白质基因的siRNAs（small interferingRNAs）文库，通过下调这些基因表达的mRNA，研究这类蛋白质在病毒dsRNA激活过程中的功能。为了模拟病毒的感染，我们用poly(I:C)作为病毒dsRNA的模拟物，通过脂质体转染的方法激活细胞内受体蛋白质RIG-I/MDA5。用NF-κB-luc和IFN-β-luc这两种报告基因监测信号通路激活的强度。我们发现蛋白质RAD23A能够负调控RIG-I/MDA5信号通路的激活，但是它的同源蛋白质RAD23B不能。此外，通过数据库的检索和体内相互作用实验，我们发现RAD23A和TRAF2在体内存在相互作用，并且能够促进TRAF2的多泛素化，下调TRAF2的蛋白质表达水平。综上所述，我们的研究提示RAD23A可能作为一个新的RIG-I/MDA5信号通路负调控分子，调节机体的抗病毒免疫反应。