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目的:研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)可以活化树突细胞(dendritic cells,以下简称DCs),通过改变DCs的性能,形成有利于Th0向Th2优势分化的微环境,从而诱发变应性鼻炎。临床发现小青龙汤治疗变应性鼻炎疗效确切,但关于其抗过敏的作用机制目前尚不明确。本实验在体外用小青龙汤对TSLP刺激DCs体系进行干预,观察小青龙汤能否在TSLP刺激DCs体系起到预防变应性鼻炎的作用。方法:1.体外建立用IL-4和GM-CSF因子培养DCs的方法。2.制备小青龙汤水提液同时CCK-8检测小青龙汤对DCs的作用。3.通过检测CD86和IL-13的表达来筛选TSLP对DCs发挥作用的最佳剂量。4.应用FCM技术检测DCs的纯度及小青龙汤体外干预小鼠TSLP刺激DCs后CD83的表达变化。5.应用Western blot法检测小青龙汤体外干预小鼠TSLP刺激DCs后p-JAKl、p-JAK3、p-STAT5、p-STAT6 及 OX40L 的表达变化。6.应用RT-PCR法检测小青龙汤体外干预小鼠TSLP刺激DCs后CCL17mRNA、CCL22mRNA的表达变化。7.体外建立DCs与T细胞共培养的方法。8.应用RT-PCR法检测小青龙汤体外干预TSLP刺激DCs-Th0后GATA-3、C-Maf、T-bet的表达变化结果:1.骨髓源性和脾源性细胞在体外均可培养出性能较好的DCs。2.较好的筛选了小青龙汤对DCs作用的最佳浓度范围。3.与空白组相比,TSLP在l0ng/ml时CD86和IL-13的表达量最高且与空白组相比有显著差异(allP<0.01)。4.与TSLP组相比,TSLPR可以明显降低OX40L,CCL17,CCL22等的表达(P<0.05)。5.与TSLP组相比,4ug/ml小青龙汤在蛋白和基因水平均可以降低OX40L的表达(al1P<0.05)。6.与TSLP组相比,2ug/ml、4ug/ml和8ug/ml小青龙汤均可以降低TARC/CCL17和 MDC/CCL22 的表达(allP<0.01)。7.与空白组相比,TSLP对IP-10的表达无明显作用。8.与TSLP组相比,小青龙汤对IP-10的表达无明显作用。9.与TSLP组相比,2ug/ml、4ug/ml和8ug/ml的小青龙汤均可以降低CCL17mRNA的表达(allP<0.01)。10.与TSLP组相比,4ug/ml和8ug/ml小青龙汤均可以降低CCL22mRNA的表达(all P<0.01)。11.与TSLP组相比,2ug/ml、4ug/ml和8ug/ml小青龙汤均可以降低GATA-3的表达(allP<0.01)。12.与TSLP组相比,4ug/ml和8ug/ml小青龙汤组C-Maf的表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。13.与空白组相比,TSLP对T-bet的表达无明显作用。14.与TSLP组相比,2ug/ml和8ug/ml小青龙汤组T-bet的表达均明显升高(P<0.01)。结论:1.体外培养骨髓细胞和脾细胞均可获得纯度和性能较好的DCs。2.TSLP可以激活DCs形成有利于Th0向Th2优势分化的微环境.3.TSLPR可以较好的阻断TSLP对DCs的刺激作用。4.小青龙汤可以通过影响CCL17,CCL22,OX40L,JAK/STAT通路等的表达在TSLP刺激DCs体系起到预防变应性鼻炎的作用。5.小青龙汤可以通过降低TSLP-activatedDCs-Th0体系GATA-3,C-Maf的表达起到预防变应性鼻炎的作用。6.小青龙汤可以升高TSLP-activated DCs-Th0体系T-bet的表达起到预防变应性鼻炎的作用。7.小青龙汤对IP-10的表达没有明显作用。