论文部分内容阅读
本文结合有效的生物活性组分的固定方法,采用信号放大技术提高分析信号、降低检测下限,发展了三种新型的免疫生物传感器以及一种无电子媒介体的酶生物传感器,主要内容如下:（1）提出了一种新型的基于酶催化沉积质量放大的高灵敏压电免疫传感器（第2章）。采用1,6-二巯基己烷在石英晶振上自组装一单分子层,再通过另一端巯基连接胶体金,利用胶体金的高比表面积和强吸附作用增加抗IgG抗体的固定量,同时借助胶体金优良的生物亲和性保持抗IgG抗体的活性。在H2O2存在下,通过标记在抗人IgG抗体上的辣根过氧化物酶（HRP）催化底物3,3’-联苯二胺（DAB）,反应生成不溶性产物沉积到石英晶振的Au电极表面,达到质量放大的目的。结果表明测定人IgG在1.6×10-8～1.0×10-4 g mL-1范围内有很好的线性关系,检测下限为1.0×10-8 g mL-1。在用于实际试样的回收率测定中,结果良好。（2）提出了一种基于酶催化沉积底物和生物素-亲和素两步放大的超灵敏免疫检测方法（第3章）。抗体通过单层蛋白A固定到金电极表面,预先处理好的生物素化抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素形成的网状复合物作为免疫反应信号的放大探针。在有H2O2存在的情况下,通过辣根过氧化物酶（HRP）催化氧化DAB（3,3’-联苯二胺）在金电极上沉积一层不溶物,引起阻抗的显著增大。该传感器用于人IgG检测,检测下限为1.0×10-8 g mL-1。我们采用法拉第阻抗和压电石英晶体微天平分别表征了该传感器的特性。（3）通过半胱胺、羧基化的碳纳米管（CNTs）固定鼠抗人绒毛膜促性腺素β-hCG抗体,构建一种新的压电免疫传感器,与仅采用半胱胺构建的传感器比较,该传感器检测下限为1.0×10-2 mIU mL-1,在6.0×10-2～1.5×102 mIU mL-1内有良好的线性关系（第4章）。（4）结合碳纳米管优良的电子传导特性,壳聚糖很好的成膜性和高的水渗透性,以及纳米ZnO的生物亲和性且比表面积大,适合用来固定生物分子,提出了一种新的无电子媒介体的HRP酶传感器（第5章）。该传感器对H2O2浓度的检测下限为1.0×10-5 M,并在5.0×10-5～2.0×10-3 M有很好的线性关系。