为了探讨籽鹅产蛋性能基因α-烯醇化酶(Alpha enolase,ENO1)对籽鹅卵泡发育的影响,本实验选取8月龄东北籽鹅5只,提取籽鹅卵泡颗粒细胞进行原代培养,按实验要求设置ENO1过表达组、腺病毒空载体组、培养液组。采用Trizol法提取3组籽鹅卵泡颗粒细胞总RNA,反转录成cDNA,然后再经PCR扩增反应得到目的片段。采用实时荧光定量PCR方法,检测ENO1过表达对籽鹅卵泡颗粒细胞Bcl-2 mRNA和Caspase-3 mRNA表达量的影响,并应用分子生物信息学相关软件进行分析。结果如下:1.经过定量PCR和western blot检测,ENO1腺病毒过表达组的ENO1 mRNA与蛋白表达量均极显著高于腺病毒空载体组和培养液组(P<0.01),证明构建的ENO1可以在籽鹅卵泡颗粒细胞中过表达,且当MOI=50,转染时间为48h,其转染率可达到100%。这说明本实验已成功构建ENO1腺病毒过表达载体转染的原代培养颗粒细胞模型。2.ENO1过表达使籽鹅卵泡颗粒细胞凋亡相关基因Bcl-2 m RNA的表达量极显著增加(P<0.01),而Caspase-3 mRNA的表达量显著降低(P<0.05)。结果表明ENO1通过参与调节凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA促进籽鹅卵泡颗粒细胞的分裂,抑制其凋亡,进而促进籽鹅卵泡的发育。本实验可为研究ENO1功能与禽类卵泡发育机制奠定理论基础。