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乙肝病毒(Hepatitis B Virus，HBV)慢性感染是肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)发生的重要危险因素之一，HBV X蛋白(HBx)是HBV的非结构蛋白，在HBV引起的HCC发生中起到重要作用。大量研究表明，HBx蛋白具有类似细胞反式作用因子的功能，可通过蛋白与蛋白之间的相互作用调节多种基因的转录。HBx蛋白还能调节多种信号转导通路，影响细胞的生理功能。HBV可通过干扰细胞钙信号促进病毒复制，其中HBx在影响细胞钙信号过程中发挥重要作用，而HBx的促肝细胞恶性转化与其对钙信号的调节之间是否存在联系，目前尚无深入研究。钙池操纵性钙通道(Store Operated Calcium Channels，SOCCs)是重要的钙通道之一，介导的钙内流称为钙库调控的钙内流(Store Operated Calcium Entry，SOCE)，参与肝细胞的多个信号通路进而影响细胞功能，但是HBx是否能通过影响SOCCs功能导致肝细胞发生恶性转化，仍需深入研究。为了深入了解HBx对肝细胞SOCCs功能的影响，揭示HBV诱导肝癌发生发展可能的机制，本实验研究了HBx对SOCCs通道蛋白Orai1和基质相互作用分子1(Stromal Interaction Molecules1，STIM1)蛋白表达情况的影响，及HBx和SOCCs对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。主要研究内容包括： ⑴HBx蛋白对STIM1和Orai1表达水平的影响。Western Blot检测结果显示HBx质粒可以在HepG2细胞内瞬时表达HBx。HepG2细胞转染pcDNA-myc-HBx质粒（HBx组）和对照质粒（对照组）后，在不同时间点（12h，24h，36h）用Western Blot方法检测STIM1和Orai1表达水平，结果显示：转染后24h和36h时，HBx组STIM1蛋白的表达量与对照组相比显著增加（P<0.05）；在三个不同的时间点，与对照组相比，实验组Orai1蛋白的表达均显著增加，差异有统计学意义（P<0.05），说明HBx可以促进SOCCs的重要组分STIM1和Orai1蛋白的表达。 ⑵HBx蛋白与SOCE对HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。为了进一步探究HBx对SOCCs的影响与HBV引起的HCC的关系，本实验运用SOCCs的拮抗剂2-氨基乙基联苯基硼酸酯(2-Aminoethoxydiphenyl Borate,2-APB)处理细胞后检测HepG2细胞增殖和凋亡的变化。HepG2细胞转染pcDNA-myc-HBx质粒和空载对照质粒，用两种浓度的2-APB（80μM和5μM）处理细胞，Western Blot方法检测四组细胞细胞周期蛋白Cyclin D1和增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA)的表达情况。检测结果显示，与转染空载质粒的细胞相比，HBx表达可促使HepG2细胞的G1期细胞周期蛋白Cyclin D1的表达量明显增加，高浓度2-APB(80Μm)处理细胞后，转染HBx的细胞Cyclin D1表达量明显减少，低浓度2-APB(5Μm)处理细胞后转染HBx的细胞Cyclin D1表达量明显增多，但是细胞周期S期标志蛋白PCNA的表达量在空载转染组和HBx转染组中没有显著差异(P>0.05)，说明HBx可以通过影响SOCCs功能增加Cyclin D1的表达，促进肝细胞从G0期进入G1期，但是不能诱导细胞从G1期进入S期。 ⑶用pcDNA-myc-HBx质粒和对照质粒转染HepG2细胞，高浓度的2-APB(80μM)处理两组转染的细胞，流式细胞术检测HepG2细胞的凋亡变化情况。结果显示用高浓度(80μM)的2-APB抑制SOCE后两组细胞凋亡率均明显上升，而且，表达HBx的细胞凋亡率低于转染对照质粒的细胞(P<0.05)，说明2-APB可以有效地抑制SOCE促进细胞的凋亡，但是HBx可以通过增强SOCE抑制细胞的凋亡。结果表明，HBx可以上调SOCCs蛋白Orai1和STIM1的表达，可能促进SOCCs介导的钙内流，影响下游的信号通路； HBx可能通过增强SOCE促使细胞从G0期进入G1期促进HepG2细胞的增殖；HBx可以通过促进SOCE抑制HepG2细胞的凋亡，总的来说，HBx可能通过调节SOCCs激活细胞内的钙信号，调节细胞的增殖和凋亡，促进HCC的发生、发展。