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桑叶（Folium Mori）是我国的传统中药材之一,含有多种功能性成分,如矿物质、维生素、食物纤维、氨基酸、植物甾醇、黄酮类、生物碱类、多糖等,具有降血糖、降血压、降低胆固醇、抗衰老、提高免疫力、抗菌、抗病毒、防癌等多种生理功能,已日益成为医药和食品领域研究热点。本文对湖州市不同采摘时间、不同种植基地、不同品种、不同部位的桑叶进行生物碱以及多糖类成分分析,同时对主要活性部位分离纯化工艺进行深入的研究,通过比较桑叶药材的内在品质,分离桑叶有效部位,为湖州桑叶开发利用提供依据。此外,还考察了分离纯化得到的桑叶总生物碱浸膏对α-葡萄糖苷酶活力的影响以及其抑制作用类型,为桑叶降血糖作用研究提供参考。1.桑叶中生物碱及多糖类成分的含量测定目的:考察不同采摘时间、不同种植基地、不同品种及不同药用部位桑叶中总生物碱、1-脱氧野尻霉素以及多糖类成分的含量差异。方法:雷氏盐比色法测定总生物碱的含量:HPLC-ELSD方法测定1-脱氧野尻霉素含量,以Agilent ZORBAX NH2（5μm,4.6×250mm）柱为分离柱:流动相:乙腈-水（80∶20）;流速1.0mL·min-1;柱温:30℃;ELSD气化室温度55℃;高纯氮作载气,压力1.5Bar。苯酚—浓硫酸法测定总多糖的含量。结果:冬季桑叶样品中总多糖的含量普遍高于其它季节样品,而生物碱类成分的含量随季节变化无明显规律;品种、种植基地以及采摘部位对桑叶中上述成分含量也有较大影响。结论:桑叶中生物碱以及总多糖的含量与种植基地、采摘时间、品种以及采摘部位等相关。2.桑叶活性部位树脂纯化工艺目的:研究分离、纯化桑叶中主要活性部位黄酮、生物碱和多糖的工艺条件及参数。方法:本文以壳聚糖作为絮凝剂对提取液进行澄清处理,并对絮凝条件进行优化。采用柱层析连续分离的方法,絮凝液依次经过大孔树脂和阳离子树脂,同时分离得到桑叶中的黄酮类、多糖类和生物碱类组份。本文以静态饱和吸附量、静态洗脱率、洗脱量为考察指标,比较了不同型号的阳离子树脂分离、纯化桑叶总生物碱的工艺。又以各成分转移率和各成分浸膏含量为指标,对最佳大孔树脂以及阳离子树脂吸附工艺条件进行了筛选。结果:壳聚糖对主要活性成分的转移率高于传统的醇沉工艺。Q2型阳离子树脂对生物碱类成分具有较好的吸附及洗脱参数,其饱和吸附量达到35.81mg·g-1干树脂;经过工艺条件优选后,总黄酮转移率和浸膏总黄酮含量平均值分别达到65.15%,71.86%;总生物碱转移率和浸膏总生物碱含量平均值分别达到74.59%,51.09%;总多糖转移率和浸膏总多糖含量平均值分别达到69.94%,60.11%。结论:R1型大孔树脂以及Q2型阳离子树脂综合性能较好,适用于桑叶中主要活性成分的分离纯化。3.桑叶生物碱浸膏对α—葡萄糖苷酶抑制作用的体外研究目的:初步研究从桑叶中提取分离得到生物碱类成分对α-葡萄糖苷酶活力的影响以及其抑制作用类型。方法:本文以拜糖平（acarbose）为阳性对照,采用α-葡萄糖苷酶体外抑制作用实验,比较了桑叶生物碱浸膏、市售的桑枝提取物以及拜糖平对α-葡萄糖苷酶的抑制作用能力差异。结果:桑叶生物碱提取物、桑枝提取物以及阳性药拜糖平对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度IC50分别为0.075mg/ml、0.142mg/ml、0.709mg/ml。其对α-葡萄糖苷的抑制作用属于竞争性可逆抑制。结论:桑叶生物碱浸膏对α-葡萄糖苷酶活力有很强的抑制作用,其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用优于市售的桑枝提取物和拜糖平。