论文部分内容阅读
必特螺旋霉素是利用基因重组技术获得的基因工程菌发酵的直接产物,它是在螺旋霉素的4”位置引入一系列酰基形成的一族多组分杂合抗生素。必特螺旋霉素具有良好的体内稳定性,因此具有很大的应用价值和市场潜力。
本文首先通过析因试验分别筛选出培养基中对必特螺旋霉素效价和组分有显著作用的因素,并对试验结果进行统计分析,将影响各指标的因素区分开来。在此基础上,对部分显著作用因子进行了具体考察,确定其合适的浓度范围和具体作用,并对其他常用氮源进行添加试验,为培养基的进一步优化提供了方向。本文还对Cu2+对必特螺旋霉素合成的影响进行了初步研究,发现在发酵前期添加Cu2+可以提高异戊酰螺旋霉素Ⅲ的比例,提高幅度达30%-35%,同时还可以降低异戊酰螺旋霉素Ⅱ的比例,从而进一步增大异戊酰螺旋霉素Ⅲ与异戊酰螺旋霉素Ⅱ的比例。在发酵中后期添加Cu2+可以刺激必特螺旋霉素效价的提高,最高可提高61.3%左右,但会造成组分的恶化,异戊酰螺旋霉素Ⅲ的比例可下降60%。
本文还系统研究了NH4+对必特螺旋霉素多组分的调控作用。研究结果表明:NH4+对缬氨酸脱氢酶有抑制作用,影响了亮氨酸代谢生成异戊酰CoA的途径。大幅度降低NH4+的浓度,可以提高缬氨酸脱氢酶的活性,改善必特螺旋霉素的组分。但氮源的不足会使菌体量下降,进而降低单位发酵体积必特螺旋霉素的产量。在低铵的基础上添加亮氨酸,可以进一步改善必特螺旋霉素的组分。