准分子激光屈光性角膜切削术后角膜细胞增殖和凋亡的实验研究

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目的 观察准分子激光角膜切削术(PRK)后角膜上皮细胞和基质细胞的增殖和凋亡状况,针对PRK手术后角膜上皮下混浊形成的可能机理以及临床应用激素治疗的有效性进行探讨。 方法 在12只日本大白兔中设立对照3只,其余9只应用轰炸式准分子激光行光学角膜切除术,术后每只兔一眼用单纯抗生素治疗,另一眼用抗生素加皮质类固醇激素治疗,皮质类固醇眼药水按每日3次,2次,1次逐月递减。术后用裂隙灯观察眼前段情况,检查角膜上皮下混浊的形成情况并记录。分别于4天、1个月及2个月随机处死三只兔取角膜,1/2用于普通光镜及免疫组化染色,另1/2用于透射电镜观察。用免疫组化方法检测兔角膜上皮细胞及基质细胞转化生长因子-β1(Transforming growth factor beta-1,TGF-β1),增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)及B淋巴细胞瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)的表达状况。 结果 应用抗生素加皮质类固醇治疗的兔眼,角膜上皮愈合较单纯抗生素组延迟(P<0.01);但角膜上皮下混浊(Haze)的程度较轻且消失快(P<0.05)。光镜下,皮质类固醇激素组角膜上皮细胞及角膜基质细胞增生均较单纯抗生素组轻;角膜浅基质层胶原纤维增生也较单纯抗生素组轻。免疫组化观察发现,术后4天时激素治疗组及单纯抗生素组均表达TGF-β1,PCNA及Bcl-2,统计学有差异。术后1月时激素应用组及单纯抗生素组TGF-β1,PCNA表达增加,其中单纯抗生素组表达水平较激素应用组高;Bcl-2在单纯抗生素组亦有较高的表达。术后2月时激素应用组中TGF-β1,PCNA及Bcl-2三种因子的表达水平接近正常对照组,而单纯抗生素组TGF-β1,PCNA较1月时仍有升高,Bcl-2的表达变化不明显。电镜下,可见到明显的凋亡细胞,1月及2月可见到增殖旺盛的角膜上皮细胞和基 安傲医科大学硕士学位论文 质细胞。激素应用组新牛的胶原排列较中纯抗牛紊组整齐,且纤维母细胞的活件 较单纯抗牛素组低。 结论 准分子激光屈光性角膜切除术门角膜上皮纫!胞及基质细胞均存在凋亡一 和增殖,皮质类固醇可降低角膜细胞增殖,抑制胶原纤维增生,减轻角膜上皮I; 混浊的发生程度。
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