论文部分内容阅读
胶原蛋白作为生物体内的重要蛋白质之一,主要存在于动物的骨骼和皮肤中。胶原蛋白只有降解成小分子的多肽和氨基酸时,才能被人体吸收。将胶原蛋白经酶分解成胶原多肽后,则很容易被人体吸收。目前,已从许多动物组织和微生物中获得胶原蛋白酶。本研究主要以海洋混合菌为菌源,筛出一株高活性胶原蛋白酶产生菌,并对该菌粗酶液中酶系的性质进行了分析,并以胶原蛋白酶作为主产物对该菌的培养基组分和发酵条件进行全面优化,获得最佳产酶条件,为产业化生产胶原蛋白肽提供了一定的技术参考。对海洋混合菌样品,经过初筛和复筛,得到一株胶原蛋白酶活力较大的菌株。通过鱼皮消化试验,看到该菌对胶原蛋白具有明显的分解作用。采用单因素法对粗酶液中酶系进行了研究。探讨了反应pH、酶的热稳定性、温度、金属离子对胶原蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶及纤维素酶活力的影响。结果表明:该菌的酶系中胶原蛋白酶和脂肪酶含量较高,淀粉酶和纤维素酶含量则极少。反应pH为8.0时,胶原蛋白酶和淀粉酶的酶活力最高,达到57.6 U/mL和8.8U/mL;反应pH为8.6时,脂肪酶的酶活力最高,达到29.4 U/mL;反应pH为8.3时,纤维素的酶活力最高,达到4.2 U/mL;综合该酶系的热稳定性与温度对酶活力的影响,反应温度应为40℃。Mg2+、Cu2+、Fe2+及Mn2+对胶原蛋白酶酶活力没有积极的影响,Mg2+和Mn2+对脂肪酶的酶活力有促进作用,酶活分别提高24.5%和14.1%。实验得出,该菌株产胶原蛋白酶的最佳条件:葡萄糖3 g/L,酵母浸粉9g/L,NaCl 5g/L,MgCl2·6H2O 4 mg/L,KCl 5 mg/L,pH8.0。培养时间为40 h,温度300C,氧气充足。在最优发酵条件下,胶原蛋白酶酶活比优化前提高了54%,达到88.7 U/mL。对发酵液中脂肪酶,淀粉酶以及纤维素酶再次进行了测定。结果脂肪酶含量为44 U/ml,与常见的脂肪酶产生菌产酶量相当,而淀粉酶和纤维素酶则含量相对较少分别为5.4 U/ml和0.93 U/ml。所以该菌日后同样可以作为脂肪酶产生菌进行开发和生产。