三叶青质量标准的研究

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三叶青药用历史悠久,具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功效。据药理研究表明三叶青药材具有抗瘤、保肝等药理作用,临床研究日益广泛。但因三叶青的炮制规范不详尽及质量标准的欠缺,影响了三叶青的合理开发与应用。针对以上问题,本文主要对药材质量控制方法(药材的检查、浸出物测定、TLC定性鉴别、含量测定、指纹图谱研究、以及活性研究)进行系统研究,为三叶青药材质量标准的建立提供理论参考。所有的方法依据《中国药典》2010年版一部附录的相关内容。首先,22批药材水分测定范围为1.83%2.47%;总灰分的测定范围65.17%95.48%;水溶性浸出物含量范围为8.17%12.19%,醇溶性浸出物含量范围为10.87%15.69%。其次,以槲皮素和芦丁为对照品,采用TLC法对三叶青药材进行定性鉴别研究。结果显示:各批次药材在槲皮素、芦丁对照品相对处显荧光黄色斑点。再次,采用紫外/可见光分光光度法建立三叶青药材总黄酮含量测定方法,其含量范围为3.026.02mg/g,方法简便易行;采用HPLC法建立三叶青药材中白藜芦醇苷和白藜芦醇的含量测定方法,其白藜芦醇苷含量范围为4.1075.79(10-3mg/g);白藜芦醇含量范围3.106.72(10-3mg/g)。然后,以选定药材建立了三叶青HPLC指纹图谱的共有模式,总标定14个共有峰,利用对照品指认2个特征峰,10批次三叶青样品的HPLC图谱相似度均大于0.900;并对不同产地的三叶青药材指纹图谱进行比较研究。所建立的三叶青HPLC指纹图谱分析方法简单,重复性良好。最后,通过DPPH清除试验及对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等抑菌试验,讨论三叶青提取物的活性。其中,三叶青提取物对DPPH的清除率高,抑菌活性一般。通过对三叶青药材质量控制方法系统研究,获得各方面数据范围,以此为基础,拟定三叶青质量标准草案,为三叶青药材质量评价提供依据。
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