明胶是失去活性的胶原,具有许多优良的理化性质,被广泛应用于食品、美容、医疗及感光材料等多种行业。目前,明胶的主要来源于动物。这样的明胶存在病毒和阮病毒的潜在危险。重组有很好的提供稳定的、可预测性,同时能知道准确的分子量。但是目前重组的明胶一般未能发生羟化或羟化的程度很低。本研究中所用到的毕赤酵母重组了明胶片段基因和明胶脯氨酰羟化酶基因,并实现了共表达。在诱导液的上清中,通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,我们检测到脯氨酰羟化酶的p亚基(二硫键异构酶)和重组明胶,并对明胶进行了N端测序,结果与明胶的理论N端氨基酸序列完全吻合我们通过对诱导条件的优化,电泳观察诱导液上清中二硫键异构酶的含量,来确定使产物最大化的诱导条件。得出的结论是在250mL摇瓶中,在装液量不超过50mL的情况下,温度为25℃,摇床转速为250rpm时,每天添加2次甲醇,添加量为2%为最佳诱导条件,湿菌密度<0.5g/mL的情况下,菌密度越大,产物积累的越多。二硫键异构酶在第四天达到一个峰值。明胶的产量在第二天就达到一个峰值。的明胶占总明胶含量不到20%,在诱导培养基中添加酮戊二酸和维生素C,不仅不能提高羟化明胶的产量,反而抑制了所有诱导产物的表达。