小地老虎高毒力白僵菌菌株筛选及应用研究

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小地老虎Agrotis ipsilon属鳞翅目夜蛾科,是重要的地下害虫,严重为害烟草、蔬菜、棉花、玉米等作物。目前,防控小地老虎主要依靠化学防治,但是长期使用化学农药,易出现抗药性、害虫再猖獗及环境污染等问题,因此,亟需寻找针对小地老虎的绿色防控措施。昆虫病原真菌具有对环境无污染、不易产生抗性、可持续控制靶标害虫等优点。其中,球孢白僵菌Beauveria bassiana是一类应用最为广泛的昆虫病原真菌,但单独使用真菌防治害虫起效较慢,而将植物源杀虫剂与球孢白僵菌合理联用,不仅可以提高防效,而且对环境友好。目前国内外有关球孢白僵菌与植物源药剂联合应用防治小地老虎的研究报道较少。因此,本研究以9株球孢白僵菌为材料,对其生长性状进行比较,并对小地老虎2龄幼虫进行了毒力测定,筛选出对小地老虎高毒力的Bb324菌株。随后研究了Bb324菌株和常用植物源杀虫剂的相容性,并评价了相容性最好的印楝素与Bb324菌株联用对小地老虎的防治效果。取得结果如下:1.小地老虎高毒力球孢白僵菌菌株筛选将供试9株球孢白僵菌接种在SDAY平板上,观察菌落生长与产孢性状。结果显示,9株球孢白僵菌菌落形态差异较小;Bbz2和Bb324菌株的产孢量与孢子萌发率较高(产孢量分别为6.17×10~7和5.33×10~7孢子/cm~2;孢子萌发率分别为94.47%和92.40%)。将9株球孢白僵菌均配制为浓度2.0×10~7孢子/m L的悬浮液,采用浸渍法测定其对小地老虎2龄幼虫的毒力和致死中时(LT50),结果表明,Bb324菌株毒力最强,处理8 d后累计校正死亡率为70.37%;该菌株LT50最短,为4.40 d。2.Bb324菌株对小地老虎的致病力及感染症状观察配制2.0×10~4、2.0×10~5、2.0×10~6、2.0×10~7和2.0×10~8孢子/m L共5个浓度的Bb324菌株孢子悬浮液,采用浸渍法进一步测定对小地老虎2龄幼虫的致病力。结果表明,Bb324对试虫的致死中浓度(LC50)为13.86×10~7孢子/m L。逐日观察Bb324侵染小地老虎2龄幼虫的症状,感染初期,试虫活动减弱,死亡后身体皱缩;2~3 d后,试虫足部、背部和头部有白色菌丝长出;4 d后虫体干瘪缩小,体表布满菌丝;5 d后体表的菌丝产生大量白色分生孢子。3.小地老虎高毒力植物源药剂筛选采用浸叶法评价了0.3%印楝素可溶液剂、0.3%苦参碱水剂和0.5%藜芦碱可溶液剂等对小地老虎2龄幼虫的毒力。结果表明,0.3%印楝素可溶液剂毒力最高,LC50为3.05 mg/L(有效成分,下同),其次为0.3%苦参碱水剂,LC50为34.22 mg/L。0.5%藜芦碱可溶液剂毒力最低,LC50为112.13 mg/L。4.Bb324菌株与印楝素单用和联用对小地老虎的毒力及防效首先对Bb324菌株与0.3%印楝素可溶液剂进行相容性测定,发现0.3%印楝素可溶液剂在0.3 mg/L(有效成分)剂量下与Bb324菌株相容性较好。室内毒力测定结果也表明,两者联用能显著提高对小地老虎2龄幼虫的致死速率。进一步通过盆栽试验评价了Bb324菌株与0.3%印楝素可溶液剂联用对小地老虎的防效。结果表明,处理后7 d,两者联用的防效为61.95%,显著高于Bb324单用的防效,表明菌药联用能够提高对小地老虎的防效。综上所述,本研究从9株球孢白僵菌菌株中筛选出了具有良好生物学性状,且对小地老虎具有高致病性中的Bb324菌株。该菌株与植物源药剂0.3%印楝素可溶液剂的相容性较好。室内和盆栽试验结果均表明,Bb324菌株与印楝素联用能够显著提高对小地老虎的防效。因此,本研究结果为探索昆虫病原真菌与植物源杀虫剂联合使用防治小地老虎提供了重要基础。
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