肝细胞癌(HCC)是全球最常见和最致命的恶性肿瘤之一,HCC大概占原发性肝癌的85%-90%。据统计,全球范围内每年有一半肝癌病人(250,000/500,000)死于肝细胞癌。其主要原因可归结为没有有效的治疗方法、病人容易产生放化疗抵抗以及高度复发性。虽然目前针对诱发肝癌发生的信号机理研究发现了许多重要的治疗肝癌的靶点分子,但是临床上有显著治疗效果,并可解决肝癌高复发难题的药物却显得捉襟见肘。因此急需找到一种能够整合细胞内多种效应分子的轴蛋白,并以此蛋白为靶点开发靶向治疗药物,从而达到改善目前治疗肝癌效率低下的目的。Gab2作为船坞蛋白受到细胞外刺激因子的激活,能够铆钉在细胞膜上招募细胞内的多种效应分子,介导多重信号转导,调控细胞增殖、细胞分化、细胞周期进程及细胞程序性凋亡等生物学功能。Gab2在体内广泛表达,但是在许多肿瘤组织中表达显著高于正常对照组织,表明Gab2可能作为一个治疗肿瘤发展的潜在靶点。即使很多研究指出Gab2可以通过多重信号网络调控诸如乳腺癌、黑色素瘤、白血病和卵巢癌的发生发展,但是其在肝癌中的调节作用及调控机理还不是很清楚。本文针对Gab2轴蛋白为靶点展开对肝癌发生信号通路的研究,逐步探究出Gab2在肝细胞癌发展过程中所招募的信号分子及其调控机制,为探究肝癌发生原因提供了一定的理论基础。本文中我们探究了 Gab2在人肿瘤组织中的表达模式,发现在肝癌组织中其表达显著高于正常粘连的癌旁组织。为了进一步确定其在原发性肝癌中的作用,我们利用野生型(WT)和Gab2转基因(Gab2敲除)小鼠,执行二乙基亚硝氨(DEN)刺激诱导小鼠原发性肝癌的发生。结果证实,Gab2敲除显著抑制了 DEN诱导的肝细胞癌的形成。利用CRISRPR-Cas9技术体外构建敲除Gab2细胞系进一步发现,Gab2的移除明显抑制了 HepG2细胞的增殖、迁移和在体成瘤能力。而过表达Gab2则显著促进了肝癌细胞的成瘤行为。为了探究Gab2影响肝癌发生的机制,我们执行了几种重要分子的抑制剂实验,发现AKT,ERK和Jak2抑制剂都可以反转Gab2过表达诱导的肝癌细胞的增殖和迁移活性。这就表明Gab2可以整合多种信号通路调控肝癌的发展进程。肝脏炎症诱发肝癌发生一直是人们讨论的热点问题,本文中我们也发现Gab2敲除不仅抑制了 DEN诱导的肿瘤形成,同时也改善了 DEN诱导的肝脏炎症反应。同时,移除Gab2显著下调了 DEN诱导的肝脏组织和小鼠血清中炎症因子IL-6和TNF-α的表达与分泌。为了进一步探寻Gab2介导肝脏炎症反应的证据,我们利用体外构建的过表达和敲除Gab2的细胞系进一步执行WB实验,发现过表达Gab2放大,而敲除Gab2减弱了 IL-6诱导的肝癌细胞Jak2/Stat3信号通路的激活以及Stat3下游的靶向调控基因的表达(Bcl-2,c-Myc和MMP-7)。我们同样在DEN诱导的小鼠组织中检测了 Stat3下游调控靶基因的表达趋势,结果证实了体外的研究结果。因此,本文揭示Gab2在肝癌形成中扮演的促癌角色,证明Gab2通过调控IL-6/Jak2/Stat3信号转导影响肝癌细胞增殖和成瘤性。我们的研究为肝癌发生机制的研究提供了重要的理论支持,并为临床上肝癌的防治提供新思路。