【摘 要】
：
在植物体细胞间和细胞内传递信息的化学分子被称为植物信号分子。信号分子对植物生长和发育至关重要,能让细胞和组织感知并响应外界环境的变化。但直到今日,仍有许多信号传导路径不够明确,而对信号传导路径的研究依赖于对信号分子的定性和定量分析。因此,植物信号分子的定量分析对于进一步研究其作用机理有重要科学意义。本论文选取植物信号分子中的油菜素甾醇（brassinosteroids,BRs）和磷酸糖这两类化合物
论文部分内容阅读
在植物体细胞间和细胞内传递信息的化学分子被称为植物信号分子。信号分子对植物生长和发育至关重要,能让细胞和组织感知并响应外界环境的变化。但直到今日,仍有许多信号传导路径不够明确,而对信号传导路径的研究依赖于对信号分子的定性和定量分析。因此,植物信号分子的定量分析对于进一步研究其作用机理有重要科学意义。本论文选取植物信号分子中的油菜素甾醇（brassinosteroids,BRs）和磷酸糖这两类化合物作为目标分析物,旨在开发高灵敏且准确、稳定的定量分析方法。液相色谱-质谱（liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS）因其具有较好的分离能力以及较高的灵敏度和选择性,已成为BRs和磷酸糖的分析检测的重要工具。然而,在实际生物样品中BRs和磷酸糖的分析检测仍然存在诸多困难。对于BRs而言,其在植物中含量极低（低至数pg/g至ng/g植物鲜重）,且由于BRs缺乏易电离基团,其质谱响应差,同时还受到复杂植物基质的干扰。因此BRs分析最大的挑战在于提升其灵敏度。目前人们开发了各种前处理方法以及硼亲和标记试剂对BRs进行富集和标记。但在简化样品前处理步骤、提高样品前处理选择性以及检测灵敏度方面仍有待进一步提高。对于磷酸糖而言,由于其亲水性强,同分异构体较多,在传统反相色谱柱上分离效果差。因此磷酸糖分析的最大挑战在于改善其色谱分离,同时提高其灵敏度。目前人们针对单糖磷酸开发了几种标记试剂并用于动物细胞样品中磷酸糖的分析中,取得了较好的效果。但植物中双糖磷酸如海藻糖-6-磷酸的色谱分离及其质谱灵敏度仍有待进一步提高。基于上述问题,本文主要通过化学标记结合LC-MS的技术来建立植物组织中BRs和磷酸糖的定量分析方法,具体内容如下:（1）利用固相硼亲和标记结合液相色谱-质谱定量分析植物组织中的BRs。首先,我们将标记试剂2-（4-硼苄基）异喹啉-2-溴化铵（2-（4-boronobenzyl）isoquinolin-2-ium bromide,BBII）通过强阳离子交换作用吸附于MCX材料表面,以此制得我们所需的固相硼亲和标记材料。接着,通过硼亲和作用在选择性地富集BRs的同时对BRs进行标记。解吸时,先向吸附有BRs的固相硼亲和标记材料中加入90%丙酮水溶液,再向其中加入20-50 mg的醋酸铵固体。此时,溶液由于盐析效应会发生分层。经过剧烈涡旋以及离心后,已被标记的BRs会从MCX材料上解吸下来并存在于有机层中;与此同时,过量的标记试剂存在于水层中。这一步骤使得标记产物得以解吸并且和过量标记试剂分离。最后,收集标记产物,进入质谱分析。该方法材料制备简单,且材料对BRs具备较高的选择性。在前处理过程中,该方法将对BRs的富集和标记步骤合二为一;将解吸与进一步除杂合二为一,简化了前处理步骤,缩短了分析时间。最后,该方法的检出限低至1.4-2.8 pg/mL,在2.8-20 mg鲜重的植物组织中就可完成内源性BRs的定量分析。（2）利用化学标记结合亲水色谱-质谱定量分析植物组织中的磷酸糖。首先,我们合成了反应活性高、质谱响应好的重氮试剂:8-（重氮甲基）喹啉（8-（diazomethyl）quinolone,8-DMQ）,并对葡萄糖-1-磷酸、葡萄糖-6-磷酸、蔗糖-6-磷酸和海藻糖-6-磷酸这4种磷酸糖进行标记。标记后,磷酸糖的色谱分离以及质谱灵敏度都得到了改善。磷酸糖同分异构体可以在亲水色谱柱上实现基线分离,检测灵敏度也有3-114倍的提升,检出限低至0.1-0.6 ng/mL。据我们所知,该方法首次将化学标记技术运用于植物中磷酸糖的分析检测中。运用该方法,我们在1 mg鲜重的植物组织中就可完成内源性磷酸糖的定量分析。
其他文献
地塞米松在临床上广泛用于具有早产风险的孕妇,可有效预防和（或）治疗早产儿的支气管肺发育不良。然而,孕期使用地塞米松具有“双刃剑”效应。流行病学和动物实验表明,孕期地塞米松暴露（prenatal dexamethasone exposure,PDE）不仅会导致子代低出生体重、同时还会诱发多器官发育毒性及成年后多种代谢性疾病易感性增加,其中包括胰腺功能异常和糖耐量减弱。胰腺是机体唯一分泌降血糖激素胰岛
图像的场景转换,在工程领域应用前景深远。因此,本文将基于生成对抗网络进行图像场景转换作为研究对象。本文详述图像处理的相关概念和分类,并讨论生成对抗网络的基本原理及模型,引出本文的研究内容。本文研究主要包括两部分,一是基于生成对抗网络的雾霾图像转换算法,二是基于生成对抗网络的图像场景转换算法。本文针对基于条件GAN的图像转换算法进行雾霾场景转换,会出现明显块效应的问题提出改进。改进优化后的基于生成对
烯烃,特别是丙烯的需求每年都在增加。如何提高丙烯的产量逐渐成为研究热点。生产烯烃的方法主要是石脑油的蒸汽裂解和催化裂化（FCC）。虽然石脑油制烯烃已经大规模用于生产丙烯,但它仍不能满足日益增长的工业化需求。因此,寻找新的丙烯增产技术变得越来越迫切。近年来,甲醇制烯烃（MTO）经历了快速发展时期。其催化过程是放热反应,并伴随大量的丁烯副产物。C4烃裂解生产丙烯也是一种有前景的选择。为了充分利用能量以
随着经济的快速发展,海上溢油事故以及大量未经处理的含油污水的排放,油污染问题越来越严重,已经危及到生态系统安全和人类健康。传统的处理含油废水的方法包括燃烧、吸附和生物降解等等,但是这些方法具有分离效率低,消耗大量的人力物力,还会产生二次污染等缺点。另外,由于各种表面活性剂的存在,不互溶的油水混合物容易乳化成液滴粒径小于20μm的乳液。表面活性剂稳定的乳液分离相对于不互溶的油水混合物分离更加困难。因
毛细管电色谱技术（CEC）作为一种具有高分离效率、高选择性、高分辨率的微分离技术,获得了分析学家的关注和研究。其中,开管毛细管电色谱柱作为CEC色谱分离柱的主要形式之一,由于具有制备简单、通透性好等优点,近年来得到了较多的应用,但其也存在相比低,载样量低的缺点。通过开发具有大比表面积,多孔结构,色谱性能优良的材料作为固定相,可以在改善其缺点的同时制备得到分离性能优良的开管毛细管电色谱柱,从而推动毛
目的:脊髓损伤是一种常见且后果严重的疾病,目前对脊髓损伤后的原发性机械损伤及继发性炎症损伤已经得到了广泛的研究,研究方向主要为神经再生的分子机制及调控、神经细胞修复机制、以及生物材料的修复机制。细胞焦亡是由caspase-1介导一种特殊形式的细胞程序性死亡,与脊髓损伤的相关研究目前鲜有报道,而GDF-11/smads通路目前已被证实可以参与细胞的生长与分化。因此为了探寻细胞焦亡信号通路及GDF-1
背景:Kv1.3通道阻断剂被广泛用于多种人类疾病治疗的研究。然而,相比于小分子药物,具有更高选择性的多肽类Kv1.3通道阻断剂往往不具备跨血脑屏障（Blood-brain barrier,BBB）的能力。BBB,作为复杂的天然屏障,主要负责维持中枢神经系统（Central nervous system,CNS）的稳态。该屏障一方面保护着机体,另一方面却限制了许多药物在CNS中发挥治疗作用的可能性。
500k V高压四分裂输电线路是电网中电能传输的重要通道,其特点是高空悬挂、强风载、高电压、大电流,它所处的特殊地理条件（如跨越大江大河、穿越崇山峻岭或森林）和恶劣的自然环境会导致防振锤异位、耐张线夹引流板螺栓松动、导线断股、线上异物悬挂等不同故障的发生,严重影响供电质量。目前,针对在高压多分裂输电线路恶劣环境下的特种作业任务主要由人工来完成,劳动强度大、作业效率较低且具安全隐患,有时需要停电作业
本论文的第一部分综述了滑膜关节的润滑机制和仿生润滑剂的研究进展。仿生润滑剂旨在应用于生物相关领域,因此有效的润滑以及良好的生物相容性、降解性和稳定性是研究仿生润滑剂的关键因素。本论文以两性离子聚合物和自然界中广泛存在的、生物相容性良好的壳聚糖为基础,重点研究壳聚糖接枝两性离子聚合物PMPC,开发出应用于生物领域的基于壳聚糖的仿生润滑剂。主要研究内容和结果如下:1.采用一步法原位接枝聚合制备了壳聚糖
能源及环境是当前世界所关注的两大重点问题。作为一种先进且无污染的工艺,光催化技术已被证明在环境修复和能量转换领域非常有效。与传统的化学方法相比,光催化技术可以在无毒和无腐蚀性试剂的情况下进行。最近,据报道半导体光催化剂已应用于氧化/还原过程,例如,可以将苯甲醇选择性氧化成苯甲醛,也可将CO2还原成CO,CH4等碳氢燃料。本论文以Ti O2为研究对象,但是Ti =O2属于宽带隙（3.2 e V）半导