IL-12基因修饰瘤苗制备及其治疗小鼠眼内黑色素瘤的实验研究

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本实验研究选用黑色素瘤细胞系B16F10细胞进行C57BL/6小鼠前房内移植,建立小鼠眼内黑色素瘤模型,及将IL-12基因转染该肿瘤细胞,对其进行分子生物学、免疫学等方面的检测,然后将转染IL-12基因的肿瘤细胞灭活后对荷瘤鼠进行早期的基因修饰瘤苗治疗,观察IL-12基因修饰瘤苗治疗眼内黑色素瘤的疗效.此外,设置IL-12基因修饰瘤苗联合佐剂即含非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)基序的寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide,ODN,CpG-ODN)治疗组,以便观察新型免疫佐剂CpG-ODN是否扩大了IL-12基因修饰瘤苗抗肿瘤效应,旨在期望探索出一条有效的瘤苗治疗眼部黑色素瘤的方案,为临床上眼部黑色素瘤的基因修饰瘤苗治疗奠定基础.第一部分小鼠眼内移植性黑色素瘤模型的建立及比较结论此3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于其来源小鼠的同基因小鼠前房内的进展不同,为建立不同需要的较为理想的眼内黑色素瘤动物模型提供了实验依据.第二部分携带mIL-12基因逆转录病毒载体的构建结论载体pLXmIL-12SN的构建成功,为mIL-12基因转染奠定了基础.第三部分外源mIL-12基因在黑色素瘤细胞B16F10中的整合及表达结论mIL-12基因可B16F10细胞中整合并表达具有生物学活性的mIL-12.B16F10-mIL-12细胞的获取为mIL-12基因修饰的B16F10细胞瘤苗的制备及该瘤苗的疗效观察奠定了基础.第四部分IL-12基因修饰瘤苗治疗小鼠眼内移植性黑色素瘤疗效的观察结论IL-12基因修饰瘤苗的抗肿瘤效应优于野生型瘤苗.IL-12基因修饰瘤苗对本实验荷瘤模型鼠起到了一定的抗肿瘤效应,尤其以机体荷瘤早期明显;新型免疫佐剂CpG-ODN可增强IL-12基因修饰瘤苗的抗肿瘤效应;基因修饰瘤苗治疗为眼内黑色素瘤的治疗提供了一条新的思路,值得进一步探索.
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