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目的:PR-Set7/SETD8/KMT5a(SET8)是能够特异性单甲基化组蛋白H4K20位的赖氨酸甲基转移酶,它在基因的转录、基因组的稳定性、异染色质的形成、细胞周期的进展及发育中均发挥着重要调控作用,这意味着它极有可能参与到肿瘤的发生、发展过程中。我们前期实验发现SET8与肝癌的生存期密切相关。本研究主要探讨SET8基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡和侵袭转移的影响。方法:1设计并体外转录合成针对人SET8基因4个特异性荧光标记的siRNA,并通过脂质体(Lipofectamine TM2000)将siRNA转入SMMC-7721细胞。利用Western blot检测4个siRNA对SET8蛋白表达的抑制作用,筛选有效的siRNA。2采用MTS法,检测SET8基因沉默对SMMC 7721细胞的增殖活性的影响。3采用Annexin V-PE/7-AAD双染色法检测SET8基因沉默诱导SMMC-7721细胞凋亡的情况。4采用划痕愈合实验和Transwell迁移实验,分别检测SET8基因沉默对SMMC-7721细胞迁移能力的影响。5采用Matrigel侵袭实验检测SET8基因沉默对SMMC-7721细胞侵袭能力的影响。结果:1与正常对照组和阴性对照组相比,SET8 siRNA-2转染组明显抑制了SET8蛋白表达水平,SET8蛋白表达抑制率为63.9%。2 MTS实验结果显示,与阴性对照转染组和正常对照组相比,SET8siRNA-2转染后的24~72小时抑制了SMMC 7721细胞增殖(P<0.01)。MTS实验说明了SET8基因沉默抑制肝癌细胞增殖。3流式细胞技术检测细胞凋亡结果显示,与阴性对照转染组和正常对照组相比,SET8 siRNA-2转染后肝癌SMMC-7721细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。上述实验表明SET8基因沉默对肝癌细胞凋亡无影响。4划痕愈合实验结果显示,阴性对照转染组和正常对照组相比,转染SET8 siRNA-2的SMMC-7721细胞向划痕中间迁移的距离明显缩小,差异有统计学意义(P<0.01)。Transwell迁移实验结果显示,与阴性对照转染组和正常对照组相比,转染SET8 siRNA-2的SMMC-7721细胞穿过基底膜的数量显著降低(P<0.01)。上述实验表明SET8基因沉默抑制肝癌细胞迁移能力。5 Matrigel侵袭实验结果显示,将SET8 siRNA-2重组质粒转染SM MC-7721细胞后,检测SET8对细胞侵袭能力的影响,与对照组相比转染SET8 si RNA-2的SMMC-7721细胞穿膜细胞数明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。上述实验结果表明SET8基因沉默抑制肝癌细胞侵袭能力。结论:SET8通过调控肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭而影响肝细胞癌的转归。