【摘 要】
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随着分子生物学技术的进展,在传统的细菌发酵生产PHB的方法之外,人们又开辟了一条利用转基因植物生产PHB的途径.利用基因工程把编码三种关键酶的基因导入植物体,利 用植物作
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随着分子生物学技术的进展,在传统的细菌发酵生产PHB的方法之外,人们又开辟了一条利用转基因植物生产PHB的途径.利用基因工程把编码三种关键酶的基因导入植物体,利 用植物作为反应器生产PHB.由于原料乙酰CoA来源及PHB积累部位的问题,人们选定质体是 生产PHB的最佳部位,需要把三种酶基因与叶绿体转导肽基因相连,从而,三种关键酶进入 叶绿体,在叶绿体中合成PHB.该实验利用已报导的三种关键酶序列,设计了对应引物,扩 增得到phbA及phbB片段,序列分析同报导基本一致;同时RT-PCR利用方法,扩增得到叶绿体信号肽序列TPSS片段,将其克隆并进行序列分析,与报导序列一致.利用引物中的XhoI片段,将基因拼构建嵌合基因TP---PhbA,TP---phbB,而后将嵌合基因转入植物表这载体PROKⅡ 中,三亲杂交,利用农杆菌介导的方法进行遗传转化,以获取转基因烟草植株.
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