白头翁皂苷B4对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231作用的实验研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pgwork2011
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目的:为了探究中药白头翁提取物(白头翁皂苷B4)对于人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的作用及其作用机制的研究。为中医药在治疗乳腺恶性肿瘤方面提供新的治疗思路和实验依据。材料与方法:准备生长状态良好的MCF-7和MDA-MB-231细胞。我们将白头翁皂苷B4分为不同浓度。通过CCK-8试验检测不同浓度梯度白头翁皂苷B4处理的人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的存活率,结果显示不同浓度的白头翁皂苷B4作用于两种人乳腺癌细胞24h后,两种乳腺癌细胞的存活率均有所下降,与对照组相比有明显差异,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测不同浓度梯度白头翁皂苷B4干扰后的人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡及其周期影响。采用蛋白印记法(Western blot)检测适当浓度的白头翁皂苷B4作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞24h后的FAS、FASL、Caspase-3的蛋白表达水平。结果:1.cck-8结果显示,白头翁皂苷B4对于人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞均具有明显的生长抑制作用。其中抑制MCF-7细胞的活性的最佳药物浓度是30μg/ml,抑制率约为52.32%。抑制MDA-MB-231细胞活性的最佳药物浓度是45μg/ml。抑制率约为56.78%。2.流式细胞仪结果提示,白头翁皂苷B4均可以使人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡,且阻滞在G1期。3.蛋白印记法(Western blot)检测结果显示,白头翁皂苷B4可以使人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡,其作用机制可能是使FAS、FASL、Caspase-3蛋白表达水平上升。4.通过显微镜镜下观察,加药之后的细胞形态与未加药的细胞形态相比较,出现细胞形态不圆润,细胞间隙增加、贴壁状态差,悬浮细胞较多等。结论:根据各项结果显示,适当浓度的白头翁皂苷B4可以抑制人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的活性,并且可以引起细胞凋亡,将两种细胞均阻滞在G1期。其作用机制可能是使FAS、FASL、Caspase-3蛋白表达水平上升。
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