卷丹花和黄花败酱降血糖活性成分研究

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本论文主要包括两方面的研究:卷丹(Lilium lancifolium Thunb)花的化学成分及对肠上皮细胞葡萄糖吸收影响的研究;黄花败酱(Patrinia scabiosaefolia Fisch.ex Trev.)正丁醇部位的化学成分及降血糖活性研究。首先,综述百合属植物的化学成分和生物活性研究进展。然后,对卷丹(L.lancifolium)花的化学成分进行系统研究,分离鉴定了8个化合物,分别为:山奈酚(1)、槲皮素(2)、柽柳黄素3-O-β-D-葡萄糖7-O-α-L-鼠李糖苷(3)、β-谷甾醇(4)、异槲皮苷(5)、咖啡酸(6)、胡萝卜苷(7)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(8)。其中化合物3为首次从该植物中获得。以Caco-2细胞为研究对象,探讨卷丹花中分离所得化合物山奈酚、咖啡酸、金丝桃苷对Caco-2细胞葡萄糖吸收的影响。使用荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)及葡萄糖测定试剂盒检测Caco-2细胞上清液中葡萄糖含量。葡萄糖检测试剂盒测定结果显示,咖啡酸和金丝桃苷能促进正常Caco-2细胞的葡萄糖摄取;荧光标记2-脱氧葡萄糖结果显示,咖啡酸和金丝桃苷能促进正常Caco-2细胞摄取葡萄糖。Western blot法检测咖啡酸和金丝桃苷对SGLT1、GLUT2相关蛋白表达水平的影响,结果显示,咖啡酸和金丝桃苷在高剂量(200μM)可显著增加SGLT1和GLUT2蛋白的表达。即咖啡酸和金丝桃苷可能通过介导SGLT1及GLUT2蛋白表达来调控葡萄糖转运,促进Caco-2细胞葡萄糖吸收。其次,课题组前期已经完成黄花败酱乙酸乙酯部位化学成分的研究,从中分离鉴定了大量环烯醚萜苷类化合物,为了得到结构新颖和有一定生物活性的化合物,我们对该植物继续进行系统的化学成分研究。应用正相硅胶、反相硅胶、MCI、凝胶等分离材料,并结合中压制备色谱(MPLC)及高效液相半制备色谱(Semipre-HPLC)等分离技术,通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)、紫外(UV)、红外(IR)等波谱分析方法对黄花败酱(P.scabiosaefolia)正丁醇部位进行系统研究,共分离鉴定出10个化合物,分别为:β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10)、乌苏酸(11)、3β-hydroxy-12-ursene(12)、patriscabioin G(13)、Blumenol A(14)、Eudesmin(15)、Sweroside(16)、patriscabioin A(17)、patriscabioin(18)。对部分化合物降血糖活性进行初步筛选,结果显示,与模型组相比,patriscabioin A(17)在25和50μM浓度下均可显著改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞上清中的葡萄糖消耗(P<0.001)。与化合物17相比,patriscabioin(18)在12.5、25和50μM浓度下更加显著地降低胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞上清中的葡萄糖含量(P<0.001)。
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