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滑菇（Pholiota nameko W-01），属于担子菌亚门（Basidiomycotina），伞菌目（Agaricales），丝膜菌科（Strophariaceae），鳞伞属（Pholiota），是一种冬、春季发生的菌盖粘滑的木腐菌，为人工主要栽培的食用菌之一。富含多糖、蛋白质、微量元素、维生素等多种生物活性物质，滑菇多糖具有抗衰老、增强免疫力、抗肿瘤、抗菌等多种药理作用。本课题以滑菇W-01为出发菌株，采用Plackett-Burman（PB）试验和响应面（responsesurface methodology, RSM）试验等方法优化了滑菇胞外多糖（exopolysaccharide，EPS）和胞内多糖（intracellular polysaccharide，IPS）的提取条件，并对EPS和IPS进行了体外和体内抗氧化活性的检测。得到以下结论：（1）EPS的最佳提取条件通过PB试验，EPS的提取条件为pH值9，浓缩倍数3倍，浓缩温度60C，乙醇倍数4，乙醇浓度75%，醇沉温度-4C和醇沉时间12h，EPS提取量达到1904.60mg/L。通过响应面试验，EPS最佳提取条件为pH值8.8，浓缩倍数1.02倍，乙醇浓度90.31%。在此条件下，EPS的提取量理论值达到3959.35mg/L。考虑到操作的方便性，将最佳提取条件调整为：pH8.8、浓缩倍数1.0、乙醇浓度90.0%。在此条件下，EPS的提取量理论值为3935.57mg/L，实际值为3933.02mg/L。（2）IPS的最佳提取条件通过PB试验，IPS的提取条件为固液比20:1，pH9.0，超声波功率400W，超声波时间800s，提取温度90C，提取时间1h，提取次数3，乙醇浓度95%，乙醇倍数4，醇沉温度-4C，醇沉时间12h，IPS提取率为2.85%。通过响应面试验，IPS最佳提取条件为固液比20.31:1，超声波时间623.01s，提取次数2.87。在此条件下，IPS的提取率理论值达到3.919%。考虑到操作的方便性，将最佳提取条件调整为：固液比20:1，超声波时间623s，提取次数3。在此条件下，IPS的提取率理论值为3.919%，实际值为3.92%。（3）EPS、IPS的体外抗氧化活性用普鲁士蓝法测定还原力，并对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH的清除能力进行了检测。结果表明，EPS和IPS具有一定的还原力，并有明显抑制·OH、O2-·和DPPH自由基的作用，呈现量效关系。EPS在500mg/L时，还原力为0.53，比对照BHT高6%，对·OH、O2-·和DPPH自由基的清除率分别为45.23%、58.37%和52.55%，分别比BHT高6.88%、2.31%和4.81%。EPS对·OH、O2-·和DPPH自由基的半数抑制浓度(EC50)分别为536.13mg/L、388.09mg/L和435.54mg/L。IPS在500mg/L时，还原力为0.59，比对照BHT高18%，对·OH、O2-·和DPPH自由基的清除率分别为53.11%、63.24%和59.33%，分别比BHT高24.91%、10.85%和18.33%。IPS对·OH、O2-·和DPPH自由基的半数抑制浓度(EC50)分别为421.83mg/L、322.39m/L和392.37mg/L。（4）EPS、IPS的体内抗氧化活性通过测定小鼠血液、心、肝、脾、肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidsade，GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷丙转氨酶（alanine trasaminase，ALT）、过氧化氢酶（catalase，CAT）的活性和脂质过氧化物丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，检测EPS、IPS对血液及各组织抗氧化的能力。结果表明，EPS、IPS能提高小鼠血液及组织中GSH-Px、SOD、ALT和CAT的活性，降低MDA的含量，表明EPS、IPS通过调节氧化酶的活性，清除自由基及抑制脂质过氧化作用，提高机体的抗氧化能力。随着浓度的增加，小鼠血液和各组织中的抗氧化酶活性增高。灌胃相同浓度的多糖溶液时，IPS组中GSH-Px、SOD、ALT和CAT活性高于EPS组（P>0.05），MDA含量低于EPS组（P>0.05）。（5）滑菇EPS、IPS分离纯化EPS经过DEAE-Cellulose柱层析分离，得到两个组分：EPS-1、EPS-2。经SephadexG-100柱层析分离EPS-2，得到3个组分：EPS-2a、EPS-2b、EPS-2c。IPS经过DEAE-Cellulose柱层析分离，得到四个组分：IPS-1、IPS-2、IPS-3、IPS-4。经Sephadex G-100柱层析分离IPS-2，得到单一对称的窄峰。试验结果表明，滑菇EPS、IPS均具有较强的体内和体外抗氧化能力，为滑菇多糖的抗氧化机制及构效关系的深入研究奠定了基础。