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建立稳定、高效的叶片不定梢再生体系是梨转基因成功的关键环节。为此,本研究分别以‘巴梨’(Pyrus communis L. cv. Bartlett)、‘考密斯’(P. communis L. cv. Comice)和‘早酥’(P. bretschneideri Rehd. cv. Zaosu)、‘身不知’(P. pyrifolia Naki. cv. Shenbuzhi)的茎尖为外植体,通过正交试验设计并结合方差分析和多重比较,探讨了最佳增殖和生根培养基配方及培养条件,并在此基础上着重研究了基因型、基本培养基、外源激素及附加物对试管苗叶片不定梢再生的影响。其试验结果表明: (1)继代增殖试验中通过增殖倍数、平均株分化芽数、平均株展叶数分析表明四个品种的最佳增殖培养基均为MS+BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L,但当采用平均株鲜重及平均株干重来考察时,品种间差异极显著。 (2)通过考察不定梢再生率、平均每叶梢数以及不定梢再生力三个指标,四个品种的最合适的不定梢诱导培养基和再生率分别是: ‘巴梨’:MS+TDZ0.5mg/L+IBA0.1mg/L,不定梢诱导率达62.8%。 ‘考密斯’:MS+TDZ3.0mg/L+IBA0.1mg/L,不定梢诱导率达55.6%。 ‘早酥’:NN69+TDZ1.0mg/L+NAA0.4mg/L,不定梢再生率为75.0%。 ‘身不知’:NN69+TDZ1.0~1.5mg/L+NAA0.1mg/L,不定梢再生率为62.6~71.4%。 (3)0.1~0.5mg/L、0.1~2.0mg/L、0.1~4.0mg/L和0.1~0.5mg/L的AgNO3分别对‘巴梨’、‘考密斯’、‘早酥’和‘身不知’叶片再生有促进作用,AgNO3浓度为0.1mg/L时,可显著提高‘考密斯’、‘早酥’、‘身不知’叶片不定梢的再生频率。 (4)NH4+-N/NO3--N为0:1~1:7时,‘身不知’、‘早酥’的不定梢再生率及再生力都呈上升趋势,其中以1:7时的上升幅度最大。但NH4+-N/NO3--N为0:1时,没有不定梢发生。 (5)结合生根率、平均根数、平均根长、平均株根鲜重及平均株根干重全面分析,四个品种的最佳生根条件分别是: ‘巴梨’:在1/4MS+IBA1.0mg/L+蔗糖15.0g/L上光培养10天后转入1/4MS+IBA1.0mg/L+蔗糖15.0g/L+AC1.0g/L; ‘考密斯’:在1/2MS+IBA5.0mg/L+蔗糖15.0g/L上光培养10天后转入1/2MS+IBA5.0mg/L+蔗糖15.0g/L+AC1.0g/L;‘早酥’:在Ms+I BA2.sm叭+蔗糖巧.0叭上暗培养10天后转入MS+蔗糖15.0留毛+ACO.sg/L;‘身不知’:在1/4 MS+I BA2.smg/L十蔗糖5.og/L上暗培养10天后转入1/4 MS+蔗糖5 .og/L+ACO.sg/L。