超重力处理对番茄幼苗生理指标和相关基因表达的影响

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超重力处理影响了种子萌发和早期幼苗的生长发育,但其生理与分子机理,以及该处理在园艺植物栽培中的潜在应用价值尚不完全清楚。本试验通过离心机模拟超重力环境,通过超重力1000×g处理生长5 d的转基因拟南芥幼苗,首先分析了超重力处理对植物基因表达谱的影响。然后分别以1000×g、2000×g、4000×g、8000×g对番茄种子进行1 h离心处理,研究了超重力处理对番茄种子发芽率以及生长25 d幼苗各项生理生化指标的变化情况,并通过q RT-PCR技术分析番茄中逆境响应基因的表达情况。研究获得以下实验结果:1.超重力处理对拟南芥幼苗基因表达谱的影响:通过超重力1000×g处理生长5 d的拟南芥Col-0幼苗,进行转录组分析。得到了上调基因1263个,下调基因1028个。这些差异表达的基因被注释到GO功能的42个功能组中,其组分主要集中在代谢过程和细胞过程等。超重力处理显著影响了植物激素响应、胁迫响应和抗氧化相关基因的表达和光合同化过程,改变了植物生长发育。KEGG富集分析发现,452个上调差异基因显著富集在4个通路中,407个下调基因显著富集在10个通路中。2.超重力处理对拟南芥幼苗根尖生长素分布的影响超重力处理后,在缓苗30 min内DR5:GUS、DR5:GFP、PIN1:GFP和PIN2:GFP表达情况与对照相比均增加,但AUXI::YFP表达无明显差异;在缓苗2 h内DR5:GUS和DR5:GFP表达高于对照,2 h后表达情况与对照相比无明显差异。这些结果表明超重力处理增加了生长素外运蛋白PIN1和PIN2的丰度,进而增加根尖生长素水平。3.超重力对番茄种子发芽率的影响:在超重力处理后24 h内1000×g、2000×g的发芽率提升幅度最大,但各处理的发芽率均低于对照;超重力处理后的24~48 h期间仅有1000×g处理发芽率高于对照组;发芽结束后所有处理组仍低于对照组,整体趋势表明超重力对番茄种子的发芽有一定的抑制作用。4.超重力处理对幼苗鲜重及生理指标含量的影响:超重力处理后,提高了25 d幼苗的地上部鲜重,在4000×g处理下鲜重最高,25 d幼苗处理组中丙二醛(MDA)含量随着离心力的增加呈先下降后上升的趋势,在2000×g处理条件下MDA含量最低且与对照组相比呈极显著趋势。可溶性蛋白、可溶性糖呈现先升高后降低的趋势,其中在4000×g处理下可溶性糖的含量达到最大值;2000×g处理下可溶性蛋白含量最高且与对照组相比显著增加了29.7%;适宜的超重力处理可增加番茄叶面叶绿素含量,以及丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸等氨基酸含量。超重力环境是一种极端物理环境,番茄通过增加体内的渗透调节物质含量,保证正常生长发育。5.超重力处理对幼苗抗氧化酶活性的影响:超氧化物歧化酶(SOD)活性随超重力的增加呈现逐渐上升的趋势,且处理组中酶活性均极显著高于对照组,8000×g处理酶活性达最大值。过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性呈先增后降的趋势,在2000×g处理过氧化物酶活性最高。综上所述,超重力处理可提高25d幼苗活性氧的清除能力,增强其对重力刺激环境的适应性。6.超重力处理对幼苗中逆境响应基因表达量的影响:超重力处理对Sl MCP2f、Sl DEAD31、SIMAPK6、SIETR6和ASR1等5个逆境响应基因表达量均有不同程度的影响。其中超重力处理整体上抑制了Sl MCP2f和SIMAPK6两个负调控植物抗逆性基因的表达量,诱导了SIETR6、Sl DEAD31和ASR1三个正调控基因的表达。以上研究结果为进一步探明超重力处理影响植物生长发育的生理与分子机理提供了理论基础,也为农业生产上超重力处理的应用提供了技术支持。
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