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高效抗逆转录病毒疗法(HAART)治疗艾滋病在过去的几年里取得了很好的效果,但仍然存在耐药性、毒副作用大、费用昂贵、无法清除病毒等一系列问题。传统中药和药用植物来源的天然化合物具有结构多样性、毒性较低、来源广泛等特点,因而在防治艾滋病方面有着独特的优势和巨大的潜力。并且目前已经从动物、植物以及微生物中分离得到许多具有抗HIV-1活性的化合物,包括生物碱、香豆素、木脂素、醌类、多酚类、黄酮类、萜类、鞣质类等。前期工作通过与中科院昆明动物研究所合作,我们在植物和高等真菌的提取物中发现了一系列结构新颖具有抗HIV-1活性的化合物。但是目前这些化合物的作用靶点不清楚,本文主要就其中的六种化合物的抗HIV作用机制展开深入研究。
本研究首先对五种化合物(SM-10、Flazin、DC8e、KY008、HGM8)的作用机制进行了初步的研究,从中筛选出了具有较高抗HIV活性以及新型作用靶点的化合物SM-10。SM-10是从小花五味子中提取的一种木脂素类化合物,研究结果表明,SM-10可以选择性的抑制HIV-1的复制,而对同样是逆转录病毒的MLV没有影响。并且,通过Real-time PCR检测病毒特异性DNA产物,发现SM-10可以抑制HIV-1整合前复合体的入核。SJP-L-5是在SM-10结构基础上进行衍生改造后的产物。在先前的研究中发现,SJP-L-5(EC50,0.44μg/ml)表现了比SM-10(EC50,0.72μg/ml)更强的抗HIV活性。在本文中我们发现,SJP-L-5同样可以选择性的抑制HIV-1整合前复合体的入核。进一步研究结果显示,SJP-L-5对参与HIV-1整合前复合体核输送的三个病毒蛋白(整合酶、基质蛋白、病毒蛋白R)的核输送过程没有影响。通过“Fate-of-Capsid”实验,我们发现SJP-L-5可抑制HIV-1衣壳蛋白从整合前复合体上解离,导致不能形成功能性的整合前复合体。以上结果表明,SJP-L-5可以通过抑制HIV-1整合前复合体的脱壳限制HIV-1在宿主细胞的复制。SJP-L-5的这种新的作用机制为抗HIV-1试剂的研究提供了新的治疗方向,或许在不久的将来,这种低毒的天然化合物可作为一种新的抗HIV-1药物治疗抗药性的病毒。